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慢性乙型肝炎病毒感染病毒复制与肝细胞内质网应激反应相关性的初步研究
引用本文:李 滢,何毅怀,杨方万,穆茂媛,林世德. 慢性乙型肝炎病毒感染病毒复制与肝细胞内质网应激反应相关性的初步研究[J]. 现代生物医学进展, 2019, 19(4): 690-695
作者姓名:李 滢  何毅怀  杨方万  穆茂媛  林世德
作者单位:贵州省遵义医学院附属医院感染科;贵州省遵义医学院附属医院介入科
基金项目:国家自然科学基金项目(81160067/H0318)
摘    要:目的:研究体内、体外乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制水平与肝细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ER stress)反应基因表达的相关性。方法:选择7例慢性HBV感染者作体内研究,用液氮冷冻保存肝脏穿刺活检组织,检测肝功能并提取m RNA;体外研究分三组,转染组(HepG2.2.15)为HBV基因转染人肝癌细胞株,对照组(HepG2)为人肝癌细胞株,干预组(3TC)为50μg/m L拉米夫定作用于HBV基因转染人肝癌细胞。分别培养2天、4天、6天后收集细胞提取m RNA。HBV DNA载量的测定用实时定量聚合酶链反应(PCR);活化转录因子4 (ATF4)、转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)、活化转录因子6(ATF6)、X盒结合蛋白1(XBP1)及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的m RNA表达,用SYBR Green荧光定量逆转录聚合酶链反应(SYBR Green RT-PCR)检测,以β-actin为内参照;GRP78的表达用蛋白免疫印迹法(WB)检测。结果:体内研究结果表明:XBP1、GRP78、CHOP及ATF6基因表达水平与病毒载量、炎症程度及肝组织纤维化程度无显著相关性(P0.05);ATF6与GRP78基因表达水平和HBV DNA水平呈显著正相关(P0.05)。体外研究结果表明:干预组细胞培养2天至6天HBV DNA水平下降,CHOP、GRP78、ATF6及XBP1基因表达水平在三组之间差异无统计学意义(P0.05);WB结果表明,转染组细胞GRP78的表达培养4天与6天相比差异无统计学意义(P0.05),干预组培养6天后与转染组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:研究结果提示体内HBV复制水平与肝细胞ER stress反应显著相关,而肝脏炎症程度及肝脏纤维化程度等与ER stress反应无明显相关性;体外三组细胞之间ER stress基因的表达无显著差异(P0.05)。

关 键 词:乙型肝炎病毒;内质网应激;HepG2.2.15细胞;拉米夫定
收稿时间:2018-06-06
修稿时间:2018-06-30

A Preliminary Study on the Correlation between the Replication of Hepatitis B Virus and Endoplasmic Reticulum Stress of Hepatocytes
LI Ying,HE Yi-huai,YANG Fang-wan,MU Mao-yuan and LIN Shi-de. A Preliminary Study on the Correlation between the Replication of Hepatitis B Virus and Endoplasmic Reticulum Stress of Hepatocytes[J]. Progress in Modern Biomedicine, 2019, 19(4): 690-695
Authors:LI Ying  HE Yi-huai  YANG Fang-wan  MU Mao-yuan  LIN Shi-de
Affiliation:Infectious Department, Affiliated Hospital of Zunyi Medical College, Zunyi, Guizhou, 563000, China,Infectious Department, Affiliated Hospital of Zunyi Medical College, Zunyi, Guizhou, 563000, China,Infectious Department, Affiliated Hospital of Zunyi Medical College, Zunyi, Guizhou, 563000, China,Interventional department, Affiliated Hospital of Zunyi Medical College, Zunyi, Guizhou, 563000, China and Infectious Department, Affiliated Hospital of Zunyi Medical College, Zunyi, Guizhou, 563000, China
Abstract:
Keywords:Hepatitis B virus   Endoplasmic reticulum stress   HepG2.2.15 cells   Lamivudine
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