| Lefty1对小鼠胚胎干细胞分化过程的影响 |
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| 引用本文： | 刘 洋,杜 晋,吴 平,李 轩,张 璐. Lefty1对小鼠胚胎干细胞分化过程的影响[J]. 现代生物医学进展, 2019, 19(2): 201-206 |
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| 作者姓名： | 刘 洋 杜 晋 吴 平 李 轩 张 璐 |
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| 作者单位： | 清华大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 科技部-清华大学-北京大学生命学院联合中心基金项目 |
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| 摘 要： | 目的:研究Lefty1在小鼠胚胎干细胞分化过程中的作用。方法:根据染色质免疫沉淀测序结果,在临近Lefty1转录起始位点以及与之相距10 kb的上游区域有TGF-β信号通路Smad2/3蛋白的四个结合区域,通过CRISPR/Cas9方法获得四个区域敲除的单克隆细胞,利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测各细胞中Lefty1的转录水平,并用TGF-β信号通路的激活剂AC和抑制剂SB分别处理敲除的细胞,检测其对TGF-β信号的响应,最后通过胚状体形成实验,检测敲除细胞系在中内胚层分化过程中的标志分子Gsc和Mixl1的表达。结果:利用CRISPR/Cas9方法成功获得不同区域敲除的单克隆细胞,与野生型E14细胞相比,四种区域敲除的细胞中Lefty1 RNA含量明显降低,并且在干细胞状态和分化状态下,敲除细胞系对TGF-β信号的响应减弱。在胚状体形成的实验中,与野生型E14细胞相比,敲除细胞系在分化过程中Lefty1表达的基础水平明显降低,中内胚层分化的标志分子Gsc和Mixl1转录水平也明显下降。结论:在胚胎干细胞中,Lefty1转录起始位点附近以及上游10 kb的这四段区域通过TGF-β信号通路对Lefty1的转录发挥调控作用,从而影响中内胚层分化过程中的标志分子Gsc和Mixl1的表达。
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| 关 键 词： | TGF-β信号通路；Lefty1；转录调控；胚胎干细胞分化 |
| 收稿时间： | 2018-03-30 |
| 修稿时间： | 2018-04-27 |
The Role of Lefty1 in the Process of Mouse Embryonic Stem Cell Differentiation |
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| LIU Yang,DU Jin,WU Ping,LI Xuan and ZHANG Lu. The Role of Lefty1 in the Process of Mouse Embryonic Stem Cell Differentiation[J]. Progress in Modern Biomedicine, 2019, 19(2): 201-206 |
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| Authors: | LIU Yang DU Jin WU Ping LI Xuan ZHANG Lu |
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| Affiliation: | School of Life Sciences, Tsinghua University, Beijing, 100084, China,School of Life Sciences, Tsinghua University, Beijing, 100084, China,School of Life Sciences, Tsinghua University, Beijing, 100084, China,School of Life Sciences, Tsinghua University, Beijing, 100084, China and School of Life Sciences, Tsinghua University, Beijing, 100084, China |
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