sIL-16在大肠杆菌中的表达及活性分析 |
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引用本文: | 巩艳,叶治家,甘立霞,何凤田,曹廷兵,彭家和.sIL-16在大肠杆菌中的表达及活性分析[J].生命科学研究,2002,6(4):318-321,355. |
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作者姓名: | 巩艳 叶治家 甘立霞 何凤田 曹廷兵 彭家和 |
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作者单位: | 第三军医大学,生物化学与分子生物学教研室,中国,重庆,400038 |
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基金项目: | 全军九五卫生基金(96L031),重庆市攻关项目(97043) |
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摘 要: | 用PCR法扩增本室保存的sIL-16cDNA片段,插入含T7启动子的表达载体pET28a( )中构建重组质粒pET-sIL16,转化大肠杆菌BL21(DE3),低温经IPTG诱导蛋白表达,过Ni^2 螯和层析柱一步纯化表达蛋白,重组蛋白与Jurkat细胞共同孵育后,观察它对细胞表面IL-2R表达的影响,结果发现IPTG诱导蛋白表达后,经SDS-PAGE电沪,可以看到在18kD左右出现明显蛋白表达条带,表达量占菌体可溶蛋白的40%左右,纯化蛋白的纯度达90%以上,经重组蛋白处理过的Jurkat细胞表面IL-2R的表达水平比未经它处理的细胞增高了18.54%。
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关 键 词: | sIL-16 大肠杆菌 表达 活性分析 纯化 |
文章编号: | 1007-7847(2002)04-0318-04 |
Expression of sIL-16 in E. coli and Its Activity Analysis |
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Abstract: | |
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Keywords: | sIL-16 expression purification activity |
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