TNF-α通过激活蛋白磷酸酶4调节HepG2细胞中JNK磷酸化 |
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作者姓名: | 黄秀清 赵红叶 焦娟 黎健 |
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作者单位: | [1]卫生部北京医院老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室,北京市100730 [2]卫生部北京医院老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室,北京市,100730;北京协和医学院研究生院,北京市100730 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(No.30801218) |
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摘 要: | 目的 探讨蛋白磷酸酶4(protein phosphatase 4,PP4)在肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNF-α)诱导JNK磷酸化中的作用.方法 TNF-α处理人肝癌细胞HepG2,免疫印迹检测JNK磷酸化水平和PP4表达水平,免疫沉淀结合磷酸酶活性测定法分析PP4活性变化.构建PP4磷酸酶活性缺失突变体 PP4-RL,转染HepG2细胞,经过G418筛选获得稳定表达FLAG-PP4-RL的克隆,进一步观察PP4对TNF-α诱导的JNK磷酸化的影响.结果 TNF-α处理后迅速引起HepG2细胞JNK的磷酸化,在20 min时达到峰值.PP4的表达在TNF-α处理后60 min内没有显著变化,但活性迅速增强,在20 min时达到峰值.在稳定表达FLAG-PP4-RL的HepG2细胞中,TNF-α诱导的JNK磷酸化被PP4-RL阻断.结论 TNF-α通过激活蛋白磷酸酶4调节HepG2细胞中JNK磷酸化.
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关 键 词: | HepG2细胞 蛋白磷酸酶4 TNF-α JNK |
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