| 细菌荧光素酶体外发光体系的建立及应用于NADH定量检测 |
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| 引用本文： | 梅册霞,王静雪,林洪,王晶. 细菌荧光素酶体外发光体系的建立及应用于NADH定量检测[J]. 微生物学报, 2009, 49(9): 1223-1228 |
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| 作者姓名： | 梅册霞 王静雪 林洪 王晶 |
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| 作者单位： | 中国海洋大学食品科学与工程学院食品安全性实验室,青岛,266003 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30500384）、国家高技术研究发展计划（2006AA09Z431） |
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| 摘 要： | 摘要：【目的】本研究旨在建立鳆发光杆菌（Photobacterium leiognathi）YL 荧光素酶：FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系，并对荧光素酶：FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系应用于NADH的定量检测进行初步探索。【方法】利用从鳆发光杆菌提取并经部分纯化的荧光素酶和FMN-NADH氧化还原酶，通过优化体系中各底物的添加量，实现荧光素酶的体外发光。【结果】荧光素酶：FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系为：1 mL酶液中添加100 μL十二烷醛（27 mmol/L）、0.5 μL FMN-Na（10 mmol/L）、300 μL NADH（0.14 mmol/L）。NADH与荧光素酶：FMN-NADH氧化还原酶体系的发光强度呈良好的线性关系，其线性范围为1.0×10-10 ～1.0×10-8 mol/L。【结论】荧光素酶：FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系可以简便、灵敏、快速的定量检测NADH，为其进一步应用于环境检测、食品卫生与安全等领域活细菌数量的检测奠定了基础。
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| 关 键 词： | 关键词：鳆发光杆菌；荧光素酶；FMN-NADH氧化还原酶；NADH；检测 |
| 收稿时间： | 2009-04-10 |
| 修稿时间： | 2009-06-15 |
Quantitative detection of NADH by in vitro bacterial luciferase bioluminescent |
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| Cexia Mei,Jingxue Wang,Hong Lin and Jing Wang. Quantitative detection of NADH by in vitro bacterial luciferase bioluminescent[J]. Acta microbiologica Sinica, 2009, 49(9): 1223-1228 |
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| Authors: | Cexia Mei Jingxue Wang Hong Lin Jing Wang |
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| Affiliation: | Food safety Laboratory, Food Science and Engineering Department, Ocean University of China, Qingdao 266003;Food safety Laboratory, Food Science and Engineering Department, Ocean University of China, Qingdao 266003;Food safety Laboratory, Food Science and Engineering Department, Ocean University of China, Qingdao 266003;Food safety Laboratory, Food Science and Engineering Department, Ocean University of China, Qingdao 266003 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Keywords: Photobacterium leiognathi Bacterial luciferase FMN-NADH oxidoreductase NADH Detection |
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