| 斑马鱼eomesb基因突变体的构建及其功能分析 |
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| 引用本文： | 胡金萌,杜博博,宋诗颖,张庆华,任建峰.斑马鱼eomesb基因突变体的构建及其功能分析[J].基因组学与应用生物学,2021,40(3):1047-1054. |
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| 作者姓名： | 胡金萌 杜博博 宋诗颖 张庆华 任建峰 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学,科技部海洋生物科学国际联合研究中心,上海,201306;上海海洋大学,水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室,上海,201306;上海海洋大学,水产科学国家级实验教学示范中心,上海,201306 |
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| 摘 要： | Eomesodermin (Eomes)是T-box转录因子基因家族的成员,在脊椎动物胚胎发育、模式形成和形态发生过程中发挥重要作用.斑马鱼(Danio rerio) eomesa基因的一个点突变导致其母源合子突变体胚胎发育延迟而大量死亡,而eomesa合子突变体可正常发育至性成熟,但缺失背鳍.本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了斑马鱼eomesa旁系同源基因eomesb的突变体,eomesb纯合突变体不仅可正常发育至性成熟,而且鳍的发育也完全正常.q-PCR和整体原位杂交实验结果显示,eomesa和eomesb在脑部组织具有重叠的表达域,eomesb在中脑的表达略高于eomesa,故推测两基因在脑部可能行使相似的功能,存在一定的功能冗余.对2,4,6 dpf(Days post fertilization)和6 dpf的WT和突变体q-PCR基因表达分析显示,eomesb突变对eomesa的表达没有明显影响.eomesa-/-;eomesb-/-双突变体未出现背鳍缺失以外的附加表型,推测斑马鱼eomesa和eomesb在背鳍发育过程中可能不存在功能冗余,eomesb不参与背鳍的发育过程.此外,整体原位杂交实验结果显示,eomesb突变也不影响其同源基因tbr1a和tbr1b的早期表达.eomesb纯合突变体未观察到明显表型,可能与其影响的功能不引起明显表型有关,也可能与其它基因的遗传补偿效应有关.本研究结果为深入研究斑马鱼eomesb基因的功能提供了实验材料,同时对研究eomesa与eomesb基因功能分化具有参考价值.
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| 关 键 词： | 斑马鱼 CRISPR/Cas9 Eomesa Eomesb q-PCR |
Mutant Construction and Functional Analysis of eomesb Gene in Zebrafish |
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| Hu Jinmeng,Du Bobo,Song Shiying,Zhang Qinghua,Ren Jianfeng.Mutant Construction and Functional Analysis of eomesb Gene in Zebrafish[J].Genomics and Applied Biology,2021,40(3):1047-1054. |
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| Authors: | Hu Jinmeng Du Bobo Song Shiying Zhang Qinghua Ren Jianfeng |
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