| 人母乳中分离的链球菌菌悬液的制备及其对新生小鼠成活率的影响 |
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| 引用本文： | 李硕,王晨伟,王凌华,申剑.人母乳中分离的链球菌菌悬液的制备及其对新生小鼠成活率的影响[J].基因组学与应用生物学,2021,40(4):1658-1665. |
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| 作者姓名： | 李硕 王晨伟 王凌华 申剑 |
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| 作者单位： | 上海交通大学系统生物医学研究院,系统生物医学教育部重点实验室,上海,200240;上海交通大学生命科学技术学院,微生物代谢国家重点实验室,上海,200240;上海交通大学生命科学技术学院,微生物代谢国家重点实验室,上海,200240;上海交通大学系统生物医学研究院,系统生物医学教育部重点实验室,上海,200240 |
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| 摘 要： | 为研究出生至4周龄每天口服107CFU母乳链球菌对新生小鼠的影响,需要制备在-80℃冻存4周、解冻后仍有至少1á×109 CFU/mL活菌的菌悬液.前期分离到人母乳链球菌Streptococus salivarius F286和S.parasanguinis F278.S.salivarius F286和 S.parasanguinis F278在 M17液体培养基厌氧生长至平台期时,活菌浓度高于1×109CFU/mL,分别用M17、M17+10％脱脂牛乳、磷酸盐缓冲溶液(PBS)、PBS+10％脱脂牛乳将平台期的 S.salivarius F286和 S.parasanguinis F278制成不浓缩或5倍浓缩的菌悬液,-80℃冻存4周后,只有PBS+10％脱脂牛乳制备的5倍浓缩的S.salivarius F286菌悬液和M17制备的S.parasanguinis F278菌悬液解冻后活菌数量始终高于1×109 CFU/mL.因为化学成分复杂的M17培养基可能影响动物的代谢和免疫,因此用含有PBS、10％脱脂牛乳和链球菌的菌悬液口饲动物.仔鼠出生后1～14 d,每天口饲解冻的、含有107CFUS.salivariusF286的PBS+10％脱脂牛乳菌悬液,或者新鲜制备的、含有107 CFU S.parasanguinis F278的PBS菌悬液以及等体积20％脱脂牛乳,仔鼠成活率约为83％(其余仔鼠死于母鼠拒绝喂养),说明107 CFU的S.salivarius F286或S.parasanguinis F278不会引起仔鼠感染死亡.本研究中,我们比较不同方法制备的菌悬液在-80℃冻存后细菌的存活量,确定最优的菌悬液制备方法,并评估细菌对仔鼠成活率的影响,确定了两株母乳链球菌的生物安全性,本实验流程对制备和保存用于灌胃/口饲动物的其他种类细菌的菌悬液具有借鉴意义.
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| 关 键 词： | 母乳 链球菌 菌悬液 |
Preparation of Bacterial Suspensions of Streptococcus Strains Isolated from Human Breast Milk and Their Effect on the Survival Rate of Neonatal Mice |
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| Li Shuo,Wang Chenwei,Wang Linghua,Shen Jian.Preparation of Bacterial Suspensions of Streptococcus Strains Isolated from Human Breast Milk and Their Effect on the Survival Rate of Neonatal Mice[J].Genomics and Applied Biology,2021,40(4):1658-1665. |
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| Authors: | Li Shuo Wang Chenwei Wang Linghua Shen Jian |
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