| 基于CRISPR/Cas9技术敲除SAMHD1肝癌细胞系的构建及对增殖的影响 |
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| 引用本文： | 皮思蝶,郑小川,毛彬力,胡源. 基于CRISPR/Cas9技术敲除SAMHD1肝癌细胞系的构建及对增殖的影响[J]. 基因组学与应用生物学, 2021, 40(4): 1822-1828. DOI: 10.13417/j.gab.040.001822 |
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| 作者姓名： | 皮思蝶 郑小川 毛彬力 胡源 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆,400016 |
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| 摘 要： | 运用CRISPR/Cas9基因编辑技术,建立SAMHD1基因敲除的Huh7细胞系,并检测敲除SAMHD1基因后对人肝癌细胞Huh7细胞增殖的影响.针对SAMHD1基因作用的功能区域,设计靶向SAMHD1的小向导sgRNA(Small Guide RNA).构建lentiCRISPRv2-SAMHDl-gRNA重组质粒转化后测序.筛选稳定敲除SAMHD1的稳定细胞系并测序鉴定.采用克隆形成实验分析基因SAMHD1敲除后肝癌细胞Huh7细胞的增殖能力.测序结果显示lentiCRISPRv2-SAMHDl-gRNA载体构建成功.Western blot结果和测序结果表明成功构建敲除SAMHD1的Huh7稳定细胞系.克隆形成实验结果表明,相对于Huh7-WT细胞,Huh7-KO SA-MHD1的细胞增殖能力增强(P＜0.01).成功构建基于CRISPR/Cas9技术敲除SAMHD1基因的Huh7细胞系,SAMHD1的表达缺失促进肝癌细胞的增殖.
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| 关 键 词： | SAMHD1 基因敲除 肝癌 细胞增殖 |
Construction of SAMHD1 Knockout Hepatoma Cells Employing CRISPR/Cas9 and Its Effect on Proliferation of Hepatoma Cells |
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| Pi Sidie,Zheng Xiaochuan,Mao Binli,Hu Yuan. Construction of SAMHD1 Knockout Hepatoma Cells Employing CRISPR/Cas9 and Its Effect on Proliferation of Hepatoma Cells[J]. Genomics and Applied Biology, 2021, 40(4): 1822-1828. DOI: 10.13417/j.gab.040.001822 |
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| Authors: | Pi Sidie Zheng Xiaochuan Mao Binli Hu Yuan |
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