鸡卵清蛋白基因转录起始点的确定及表达载体的构建 |
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引用本文: | 逄越,袁晓东,汤敏谦,李庆伟.鸡卵清蛋白基因转录起始点的确定及表达载体的构建[J].遗传学报,2004,31(2):151-158. |
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作者姓名: | 逄越 袁晓东 汤敏谦 李庆伟 |
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作者单位: | 1. 辽宁师范大学生命科学学院,大连,116029 2. 宝生物工程(大连)有限公司,大连,116600 |
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基金项目: | 辽宁省科技攻关项目 (编号:002057)~~ |
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摘 要: | 采用5’RACE方法确定鸡卵清蛋白基因转录起始点的位置,通过序列分析得出转录起始点为G,从而确定出核心启动子及上游调控区的位置。应用PCR技术分别扩增两段卵清蛋白基因上游调控序列的两个片段,长度分别为1.5kb和2.9kb。经PCR测序和克隆测序后,针对突变的碱基进行修复,并将修复的两片段分别连接在带有绿色荧光蛋白报告基因pGFP-N2载体上,为使pGFP-N2载体本身的CMV启动子不影响对鸡卵清蛋白启动子的研究,将其切去,构建了P1.5koval-GFP和R2.9koval-GFP两种表达载体,经酶切鉴定这两种表达载体构建正确。
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关 键 词: | 转录起始点 鸡卵清蛋白基因 启动子 绿色荧光蛋白(GFP) |
文章编号: | 0379-4172(2004)02-0151-08 |
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