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| 扣囊拟内孢霉α-淀粉酶基因的克隆和在酿酒酵母中表达 | |
| 作者姓名： | 刘玉方 陈玉梅 蔡金科 |
| 作者单位： | 中国科学院微生物研究所，中国科学院微生物研究所，中国科学院微生物研究所 北京 100080，北京 100080，北京 100080 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
| 摘 要： | 以穿梭质粒pCN60为载体,大肠杆菌C600为受体构建了扣囊拟内孢霉(Endomycopsis fibuligera)G45 Sau 3A基因文库。从基因文库中提取重组质粒DNA并转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BJ1991,选出四个具有o-淀粉酶活性的转化子,琼脂糖凝胶电泳结果证实插入的DNA片段为9.0kb。对插入DNA片段亚克隆,确定。-淀粉酶基因位于PstI-Sall 3.9kb片段上,启动子位于PstI-EcoRI 的1.3kb片段上。用亚克隆PGK11.9kb片段置换。-淀粉酶启动子区,其转化子的e-淀粉酶活性有明显提高。 |
| 关 键 词： | 酿酒酵母 克隆 扣囊拟内孢霉 α-淀粉酶 基因表 Endomycopsis jibulgera α-amylase Subcloning Gene expression |
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