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扣囊拟内孢霉α-淀粉酶基因的克隆和在酿酒酵母中表达
引用本文:刘玉方,陈玉梅,蔡金科.扣囊拟内孢霉α-淀粉酶基因的克隆和在酿酒酵母中表达[J].微生物学报,1995,35(6):404-409.
作者姓名:刘玉方  陈玉梅  蔡金科
作者单位:中国科学院微生物研究所,中国科学院微生物研究所,中国科学院微生物研究所 北京 100080,北京 100080,北京 100080
基金项目:国家自然科学基金资助项目
摘    要:以穿梭质粒pCN60为载体,大肠杆菌C600为受体构建了扣囊拟内孢霉(Endomycopsis fibuligera)G45 Sau 3A基因文库。从基因文库中提取重组质粒DNA并转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BJ1991,选出四个具有o-淀粉酶活性的转化子,琼脂糖凝胶电泳结果证实插入的DNA片段为9.0kb。对插入DNA片段亚克隆,确定。-淀粉酶基因位于PstI-Sall 3.9kb片段上,启动子位于PstI-EcoRI 的1.3kb片段上。用亚克隆PGK11.9kb片段置换。-淀粉酶启动子区,其转化子的e-淀粉酶活性有明显提高。

关 键 词:酿酒酵母  克隆  扣囊拟内孢霉  α-淀粉酶  基因表  Endomycopsis  jibulgera  α-amylase  Subcloning  Gene  expression
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