扣囊拟内孢霉α-淀粉酶基因的克隆和在酿酒酵母中表达 |
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引用本文: | 刘玉方,陈玉梅,蔡金科.扣囊拟内孢霉α-淀粉酶基因的克隆和在酿酒酵母中表达[J].微生物学报,1995,35(6):404-409. |
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作者姓名: | 刘玉方 陈玉梅 蔡金科 |
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作者单位: | 中国科学院微生物研究所,中国科学院微生物研究所,中国科学院微生物研究所 北京 100080,北京 100080,北京 100080 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目 |
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摘 要: | 以穿梭质粒pCN60为载体,大肠杆菌C600为受体构建了扣囊拟内孢霉(Endomycopsis fibuligera)G45 Sau 3A基因文库。从基因文库中提取重组质粒DNA并转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BJ1991,选出四个具有o-淀粉酶活性的转化子,琼脂糖凝胶电泳结果证实插入的DNA片段为9.0kb。对插入DNA片段亚克隆,确定。-淀粉酶基因位于PstI-Sall 3.9kb片段上,启动子位于PstI-EcoRI 的1.3kb片段上。用亚克隆PGK11.9kb片段置换。-淀粉酶启动子区,其转化子的e-淀粉酶活性有明显提高。
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关 键 词: | 酿酒酵母 克隆 扣囊拟内孢霉 α-淀粉酶 基因表 Endomycopsis jibulgera α-amylase Subcloning Gene expression |
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