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| Aeropyrum pernix K1磷脂酶A2的克隆、表达及其性质 | |
| 作者姓名： | 卢冬梅 吴英松 解桂秋 高仁钧 王智 |
| 作者单位： | 1.广州市达瑞抗体工程技术有限公司; 2.吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室; |
| 摘 要： | 从超嗜热需氧古细菌AeropyrumpernixK1中抽提出染色体基因组,经PCR扩增得到磷脂酶A2基因,用带有His-tag标记的pET15b作为表达载体,在大肠杆菌BLP中成功地诱导表达。表达产物经过Ni-螯合柱一步得到纯化。SDS-PAGE检测只有一条带,其准确分子量为17,871kD。对纯化后的磷脂酶A2测定其酶活性和生物活性,得出其最适反应温度为90℃,最适pH范围为7.8~8.2。至此首次成功地在大肠杆菌中表达了古细菌嗜热磷脂酶A2,这将为以后对该酶的结构和功能以及耐热机制研究打 |
| 关 键 词： | Aeropyrum pernix K1 磷脂酶A2 古细菌 热稳定性 |
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