OsRUS2.1酵母双杂交猎物载体的构建及其细胞毒性和自激活作用检测

采用PCR技术扩增水稻根UV B敏感基因2.1（ROOT UV B SENSITIVE 2.1，RUS2.1）四个不同片段[OsRUS2.1(1 1317)，OsRUS2.1(1 138)，OsRUS2.1(139 879)，OsRUS2.1(880 1317)]，连接到T载体pMD18 T Simple上，测序无误后分别亚克隆到猎物表达载体pGADT7上。结果表明：四个OsRUS2.1基因片段的表达载体构建成功，读码框正确；分别转化这四个猎物表达载体于酵母感受态细胞Y187中，用LacZ、MEL1活性检测法和营养缺陷型培养基SD Leu DO培养法进行自激活检测和毒性检测，结果表明构建的四个OsRUS2.1不同片段的猎物表达载体对酵母菌株Y187均没有转录激活活性和毒害作用，可用于后续研究。