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O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)基因表达的抑制对 tau蛋白磷酸化作用的影响
引用本文:杨江勇,顾建兰,施建华,刘飞,沈勤. O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)基因表达的抑制对 tau蛋白磷酸化作用的影响[J]. 生物化学与生物物理进展, 2009, 36(3): 346-352. DOI: 10.3724/SP.J.1206.2008.00326
作者姓名:杨江勇  顾建兰  施建华  刘飞  沈勤
作者单位:南通大学医学院生物化学教研室,南通,226001
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30572076).
摘    要:研究HEK293T细胞中O?鄄GlcNAc糖基转移酶(OGT)基因表达抑制对与AD密切相关的tau蛋白磷酸化与糖基化修饰的影响.以OGT基因为靶点设计三段siRNA(OGT-siRNA1~3),用脂质体的方法转染OGT-siRNA1~3进入HEK293T细胞,通过RT-PCR检测OGT-siRNA1~3对OGT mRNA的抑制.将pEGFP/OGT与OGT-siRNA1~3共转染HEK293T细胞,24 h后在倒置荧光显微镜下观察各组GFP/OGT的表达,根据GFP/OGT的表达量来评价OGT-siRNA1~3对OGT基因表达的抑制率.将筛选出的具有最佳沉默效果的OGT-siRNA与质粒pCI/ tau441共转染HEK293T细胞,48 h后Western blot检测tau蛋白糖基化与磷酸化修饰的变化.OGT-siRNA3在100 nmol/L的终浓度时对OGT基因的抑制效率最高.与Mock组相比,对OGT基因mRNA及蛋白质水平的抑制率分别可达80.0%与51.3%左右.OGT基因表达的下调使tau蛋白糖基化水平下降,而磷酸化水平增高,证实tau蛋白的糖基化负调节其磷酸化,葡萄糖摄入减少或代谢降低可能在AD的发生发展中起关键作用.

关 键 词:阿尔茨海默病  tau蛋白  O-GlcNAc糖基转移酶  RNA干扰
收稿时间:2008-05-06
修稿时间:2008-12-17

The Inhibitory Effect of OGT Gene Expression on The Level of tau Phosphorylation
YANG Jiang-Yong,GU Jian-Lan,SHI Jian-Hu,LIU Fei and SHEN Qin. The Inhibitory Effect of OGT Gene Expression on The Level of tau Phosphorylation[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 2009, 36(3): 346-352. DOI: 10.3724/SP.J.1206.2008.00326
Authors:YANG Jiang-Yong  GU Jian-Lan  SHI Jian-Hu  LIU Fei  SHEN Qin
Affiliation:Department of Biochemistry, Medical College, Nantong University, Nantong 226001, China;Department of Biochemistry, Medical College, Nantong University, Nantong 226001, China;Department of Biochemistry, Medical College, Nantong University, Nantong 226001, China;Department of Biochemistry, Medical College, Nantong University, Nantong 226001, China;Department of Biochemistry, Medical College, Nantong University, Nantong 226001, China
Abstract:
Keywords:
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