人C-反应蛋白磁微粒化学发光酶免疫测定法的建立 |
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引用本文: | 罗梦洁,肖铎,曾璇,谭楚帆,徐叶,钟志宏,刘如石,郑姣.人C-反应蛋白磁微粒化学发光酶免疫测定法的建立[J].生命科学研究,2024(2):135-142+151. |
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作者姓名: | 罗梦洁 肖铎 曾璇 谭楚帆 徐叶 钟志宏 刘如石 郑姣 |
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作者单位: | 1. 湖南师范大学医学院;2. 湘潭县人民医院消化内科;4. 免疫诊断试剂湖南省工程研究中心 |
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基金项目: | 国家自然科学基金青年基金项目(81702005);;湖南省自然科学基金项目(2019JJ50370); |
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摘 要: | 人C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)是炎症以及各种相关疾病如病毒感染、心血管疾病等诊断、治疗和预后的临床检测指标。为了建立一种快速、准确的CRP定量免疫测定方法,将表达纯化的重组CRP作为抗原免疫小鼠,获得了5株稳定分泌抗体的单克隆抗体细胞株,采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay, DAS-ELISA)初步鉴定筛选的抗人CRP单克隆抗体,并分别选择m Ab 9D6和m Ab 9G4作为捕获抗体与检测抗体,建立用于人CRP检测的化学发光酶免疫测定法(chemiluminescence enzyme immunoassay, CLEIA),最后通过测定分析临床血清CRP样本,评价CLEIA的性能。结果显示,基于9D6/9G4-AP单克隆抗体对的CLEIA测定范围为0.176 7~500μg/L (可扩展至100 mg/L);所建立的CLEIA与医院采用的免疫散射比浊法(R2:0.949 6, P<0.000 1)表现出良好的相关性,且Bland...
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关 键 词: | C-反应蛋白(CRP) 单克隆抗体(mAb) 双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA) 化学发光酶免疫测定法(CLEIA) |
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