| 摘 要： | 本实验以S100A9蛋白和星形胶质细胞为原材料,采用CCK-8法检测不同浓度S100A9对星形胶质细胞的增殖抑制效应以及检测FPS-ZM1、TAK-242对S100A9作用于星形胶质细胞后的保护作用;应用流式细胞术检测细胞凋亡变化;采用ELISA法检测S100A9作用于细胞后上清液中IL-1、IL-6和TNF-α的水平;使用Western blotting检测细胞表达JNK、P38-MAPK、Bcl-2蛋白浓度水平的变化。研究发现,与对照组相比,0.5mg/m LS100A9作用24h后,星形胶质细胞出现显著的增殖抑制效应,且凋亡率显著增高(p0.01)。S100A9+TAK-242组、S100A9+FPS-ZM1+TAK-242组作用24 h后细胞增殖抑制显著降低且凋亡率显著降低(p0.01),S100A9+FPS-ZM1组作用后凋亡率与S100A9组无显著差异(p0.05)。与对照组相比,S100A9单独作用24h后星形胶质细胞分泌IL-1、IL-6和TNF-α显著增加(p0.01),S100A9+FPS-ZM1组、S100A9+TAK-242组、S100A9+FPS-ZM1+TAK-242组,上述因子无明显变化。与对照组相比,S100A9组JNK、P38-MAPK蛋白浓度升高,而Bcl-2蛋白浓度降低;S100A9+TAK-242组、S100A9+FPS-ZM1+TAK-242组JNK、P38-MAPK蛋白浓度均降低,Bcl-2蛋白浓度升高(p0.05);S100A9+FPS-ZM1组3种蛋白浓度变化与S100A9组无明显差异。综上表明,S100A9可能通过上调JNK、P38-MAPK及下调Bcl-2蛋白表达导致细胞凋亡从而抑制其增殖。TLR-4受体的特异性抑制剂TAK-242减轻了S100A9促凋亡作用,表明S100A9可能通过结合星形胶质细胞膜上TLR-4受体促进凋亡作用。S100A9通过结合细胞膜上TLR-4受体和RAGE受体刺激细胞炎性因子产生增多。
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