稻瘟病菌MoDUO1基因的克隆、原核表达及纯化 |
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引用本文: | 吕哲,许雨晨,陈保善,彭好文.稻瘟病菌MoDUO1基因的克隆、原核表达及纯化[J].基因组学与应用生物学,2018(7). |
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作者姓名: | 吕哲 许雨晨 陈保善 彭好文 |
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作者单位: | 广西大学农学院;广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室 |
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摘 要: | MoDUO1基因是稻瘟病菌的致病基因,主要与稻瘟病菌的营养生长、分生孢子发育及致病性相关。本研究旨在构建稻瘟病菌MoDUO1基因原核表达载体,诱导表达并纯化MoDuo1重组蛋白,为后续研究蛋白互作奠定基础。通过RT-PCR扩增得到MoDUO1基因的ORF,酶切回收后与线性化p ET-30a相连,构建了原核表达载体pET-30a-Duo1,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,扩大培养至OD值为0.6~0.8,加入IPTG至终浓度为0.2 mmol/L,37℃,200 r/min诱导2 h,大量表达得到MoDuo1基因重组蛋白,纯化后得到MoDuo1蛋白。
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