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卷叶贝母法尼基焦磷酸合酶基因的克隆及表达分析
引用本文:李 锐,陈晓仪,张 阳,张甜甜,赵 琦.卷叶贝母法尼基焦磷酸合酶基因的克隆及表达分析[J].广西植物,2018,38(9):1111-1116.
作者姓名:李 锐  陈晓仪  张 阳  张甜甜  赵 琦
作者单位:成都大学药学与生物工程学院
基金项目:国家自然科学基金(31600261); 四川省教育厅自然科学重点项目(17ZA0078)[Supported by the National Natural Science Foundation of China(31600261); Key Program for Natural Science from Sichuan Provincial Department of Education(17ZA0078)] 。
摘    要:为了探究卷叶贝母(Fritillaria cirrhosa)法尼基焦磷酸合酶基因(FcFPPS)是否参与甾类生物碱合成、萜类合成等代谢过程,该研究基于转录组测序结果,通过PCR技术克隆卷叶贝母FPPS基因(FcFPPS)开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)序列,运用生物信息学方法对该基因进行分析,预测其编码蛋白的结构与功能,并通过qRT-PCR检测FcFPPS基因在野生鳞茎和再生鳞茎(通过激素组合刺激获得的组织培养物)中的表达情况,以及利用煎煮法测定野生鳞茎和再生鳞茎的总生物碱含量。结果表明:获得了1 059bp的FcFPPS ORF片段,编码352个氨基酸,并与NCBI上公布的麝香百合、虎眼万年青、春兰等植物FPPS蛋白的相似性在85%以上;对FcFPPS蛋白的二级、三级结构预测发现FcFPPS蛋白主要由α螺旋构成;qRT-PCR与总生物碱含量测定结果显示FcFPPS基因的表达水平与总生物碱含量的变化趋势一致,都是再生鳞茎高于野生鳞茎。FcFPPS蛋白质特征区及同源性等生物信息学分析结合qRT-PCR的测定结果证明FcFPPS可能是一个有生物学功能的蛋白质,这为后续利用基因工程手段提高卷叶贝母中生物碱含量奠定了理论基础。

关 键 词:卷叶贝母    法尼基焦磷酸合酶    克隆    生物信息学    基因表达
收稿时间:2018/3/19 0:00:00

Cloning and expression analysis of farnesyl diphosphate synthase gene in Fritillaria cirrhosa
LI Rui,CHEN Xiaoyi,ZHANG Yang,ZHANG Tiantian,ZHAO Qi.Cloning and expression analysis of farnesyl diphosphate synthase gene in Fritillaria cirrhosa[J].Guihaia,2018,38(9):1111-1116.
Authors:LI Rui  CHEN Xiaoyi  ZHANG Yang  ZHANG Tiantian  ZHAO Qi
Institution:College of Pharmacy and Biological Engineering, Chengdu University, Chengdu 610106, China
Abstract:
Keywords:Fritillaria cirrhosa  farnesyl diphosphate synthase  cloning  bioinformatics  gene expression
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