| 运用BioID技术筛选水稻GS3互作蛋白 |
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| 引用本文： | 杜荣裕,周泽娇,冯嘉琳,刘 赛,阳辉勇,李洪清. 运用BioID技术筛选水稻GS3互作蛋白[J]. 广西植物, 2018, 38(6): 771-780 |
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| 作者姓名： | 杜荣裕 周泽娇 冯嘉琳 刘 赛 阳辉勇 李洪清 |
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| 作者单位： | 华南师范大学生命科学学院广东省植物发育生物工程重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31571759)[Supported by the National Natural Science Foundation of China(31571759)] 。 |
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| 摘 要： | 水稻异源三聚体G蛋白系统中的非典型γ亚基GS3,是一个控制籽粒大小的主效数量效应基因座,在调节籽粒大小中发挥负调控因子的功能。BioID(proximity-dependent biotin identification)为邻近蛋白标记技术,其工作原理是生物素连接酶能使其周围的蛋白带上生物素,同时生物素又能和链霉亲和素紧密结合,所以能够利用链霉亲和素偶联的磁珠富集目标蛋白。该技术具有灵敏、高效和周期短等特点,为筛选互作蛋白提供了新方法。为了解析GS3的蛋白调控网络,该研究以水稻原生质体为材料,采用BioID技术对GS3在水稻中的互作蛋白进行了筛选。Western-blot结果表明:融合蛋白Bir AG-GS3在原生质体中成功表达并生物素化GS3邻近蛋白。使用链霉亲和素磁珠富集生物素化后的蛋白,并进行蛋白质谱测序,获得了与GS3邻近的可能存在直接或间接互作的蛋白。将获得的蛋白进行功能富集与注释,并构建蛋白-蛋白互作网络。对部分蛋白进行了BiFC验证,发现GS3可能与ICL、PPDK、RPN7和RH15发生相互作用,涉及能量代谢的调节、种子淀粉物质的储存、泛素-蛋白酶体系统以及凋亡途径等生物过程。
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| 关 键 词： | BioID GS3 水稻 籽粒大小 互作蛋白 |
| 收稿时间： | 2018-04-04 |
Screening of interaction proteins of GS3 in rice using BioID |
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| DU Rongyu,ZHOU Zejiao,FENG Jialin,LIU Sai,YANG Huiyong,LI Hongqing. Screening of interaction proteins of GS3 in rice using BioID[J]. Guihaia, 2018, 38(6): 771-780 |
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| Authors: | DU Rongyu ZHOU Zejiao FENG Jialin LIU Sai YANG Huiyong LI Hongqing |
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| Affiliation: | Guangdong Provincial Key Laboratory of Biotechnology for Plant Development, School of Life Sciences, South China Normal University, Guangzhou 510631, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | BioID GS3 rice grain size interaction proteins |
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