用构建的新型BmNPV载体在家蚕高效表达人β-干扰素 |
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引用本文: | 邓继先,王少飞,杨琴,程萱,李琳.用构建的新型BmNPV载体在家蚕高效表达人β-干扰素[J].生物工程学报,1995,11(2). |
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作者姓名: | 邓继先 王少飞 杨琴 程萱 李琳 |
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作者单位: | 军事医学科学院生物工程研究所 北京 100071 |
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摘 要: | 构建了家蚕核多角体病毒(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus,BmNPV)新型载体pBm92,该载体将多角体蛋白基因的起始密码ATG改变为ATT,然后在多角体蛋白基因的+12位后连接有5个外源基因的克隆位点。将HulFN-β基因克隆在多角体蛋白基因的+12位后,构建了pBmIFN+12;同时构建了HuIFN-β克隆在-3位后的转移载体pB.mIFN-3。将两种转移载体DNA分别与BmNPV基因组DNA共转染Bm—N细胞。利用重组病毒不产生多角体蛋白的特征,筛选重组病毒。用HuIFN-β基因探针与重组病毒DNA进行杂交鉴定。重组病毒BmIFN+12感染Bm-N细胞,其上清IFN活性为2.0×106Iu/ml,将BmIFN+12注射5龄家蚕虫体,表达水平为5.O×107Iu/ml,是HulFN-β基因克隆在多角体蛋白基因的-3位后获得的重组病毒表达量的2—4倍。构建的新型BmNPv载体能够在家蚕高效地表达HuIFN-β。家蚕虫体生产的rHulFN-β蛋白具有天然HuIFN-β的抗原性。
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关 键 词: | BmNPV,转移载体,β-干扰素,基因表达 |
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