抗凝血酶Ⅲ转基因山羊外源基因拷贝数及其蛋白表达量的测定 |
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引用本文: | 杨继山,董晓,潘庆杰.抗凝血酶Ⅲ转基因山羊外源基因拷贝数及其蛋白表达量的测定[J].生物技术通讯,2010,21(3):393-396. |
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作者姓名: | 杨继山 董晓 潘庆杰 |
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作者单位: | 青岛农业大学,动物生殖发育与基因工程研究所,青岛,266109 |
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基金项目: | 青岛科技发展计划项目,"泰山学者"建设工程专项项目 |
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摘 要: | 目的:检测抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)转基因山羊外源基因的拷贝数及ATⅢ蛋白的表达量,分析拷贝数与蛋白表达量的相关性。方法:用Primer 5.0软件设计外源基因ATⅢ及山羊管家基因GAPDH的引物,以倍比稀释的标准品进行实时荧光定量PCR,制作标准曲线,通过标准曲线计算外源基因拷贝数;通过酶显色底物法检测ATⅢ蛋白的含量。结果:依据ATⅢ和GAPDH基因标准曲线方程计算得到的山羊个体间外源基因的拷贝数相差很大,最少的为5,最多为25,且不同转基因山羊间ATⅢ表达水平的差别达10倍以上。结论:外源基因表达水平在受到拷贝数的影响外,也受到整合位点等其他因素的重要影响。
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关 键 词: | 抗凝血酶Ⅲ 基因拷贝数 蛋白表达量 转基因 山羊 |
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