| 融合基因GAD-IL-4的克隆及其在毕赤酵母中的表达 |
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| 引用本文： | 靳晓霞,魏文强,张京家,王翠艳.融合基因GAD-IL-4的克隆及其在毕赤酵母中的表达[J].生物技术世界,2013(8):63-65. |
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| 作者姓名： | 靳晓霞 魏文强 张京家 王翠艳 |
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| 作者单位： | 内蒙古工业大学化工学院;内蒙古乌拉特前旗第一中学; |
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| 基金项目： | 内蒙古自然科学基金(No.2009BS1201);内蒙古工业大学科学研究项目(X201206)资助 |
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| 摘 要： | 谷氨酸脱羧酶(GAD)是糖尿病的始动靶抗原,白细胞介素4(IL-4)与自身免疫性疾病密切相关。本研究通过重叠延伸PCR(Gene splicing by overlap extension,SOE PCR)技术扩增得到融合基因GAD-IL-4,构建重组酵母表达载体pPIC9K-GAD-IL-4。线性化pPIC9K-GAD-IL-4,通过电转化法转化毕赤酵母菌GS115。以0.5%的甲醇对酵母工程菌GS115/pPIC9K-GAD-IL-4进行诱导表达。经SDS-PAGE检测,在发酵上清中出现与预期大小相符的蛋白条带,表明融合基因GAD-IL-4在酵母细胞中实现正确表达,为下一步利用重组融合蛋白GAD-IL-4奠定了良好的实验基础。
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| 关 键 词： | 谷氨酸脱羧酶(GAD65) 白细胞介素4(IL-4) 融合基因 克隆 毕赤酵母 |
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