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| p16真核表达载体的构建及其稳定表达的NIH3T3细胞株的建立 | |
| 引用本文： | 张守纯,王太一,于业辉,李华. p16真核表达载体的构建及其稳定表达的NIH3T3细胞株的建立[J]. 中国实验动物学报, 2005, 13(1): 23-26 |
| 作者姓名： | 张守纯 王太一 于业辉 李华 |
| 作者单位： | 1. 中国医科大学基础医学院,沈阳,110003;沈阳农业大学畜牧兽医学院,沈阳,110161 2. 中国医科大学基础医学院,沈阳,110003 3. 沈阳农业大学畜牧兽医学院,沈阳,110161 |
| 摘 要： | 目的 构建pCR○R3 1 p16真核表达质粒 ,并建立其稳定表达的NIH3T3细胞株。方法 将人的p16cDNA亚克隆至pCR○R3 1,将该重组质粒转化DH5α感受态大肠埃希菌 ,筛选阳性克隆 ,进行EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定及DNA测序 ,将已鉴定的pCR○R3 1 p16经脂质体介导转染至NIH3T3细胞中。结果 重组质粒双酶切后 ,出现约 80 0bp片段 ,提示p16cDNA片断已插入pCR○R3 1多克隆位点内 ,DNA测序显示p16cDNA按照正确方向和阅读框插入表达载体pCR○R3 1。通过pCR○R3 1 p16转染NIH3T3细胞 ,获得 10个G4 18抗性克隆 ,其中 2个为RT PCR阳性。结论 成功构建pCR○R3 1 p16真核表达载体并建立了其稳定表达的NIH3T3细胞株。为建立p16转基因鼠奠定基础。 |
| 关 键 词： | 基因 p16 真核细胞 N3T3 转染 表达 |
| 文章编号： | 1005-4847(2005)01-0023-04 |
| 修稿时间： | 2004-08-20 |
Construction of pCR(R) 3.1/p16 Plasmid and Establishment of NIH3T3 Cell Line with Stable Expression of Exogenous p16 Gene |
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| ZHANG Shou-chun,WANG Tai-yi,YU Ye-hui,LI Hua. Construction of pCR(R) 3.1/p16 Plasmid and Establishment of NIH3T3 Cell Line with Stable Expression of Exogenous p16 Gene[J]. Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica, 2005, 13(1): 23-26 | |
| Authors: | ZHANG Shou-chun WANG Tai-yi YU Ye-hui LI Hua |
| Affiliation: | ZHANG Shou-chun 1,2,WANG Tai-yi1,YU Ye- hui2,LI Hua1 |
| Abstract: | |
| Keywords: | Genes p16 Eukaryotic cells 3T3cells Transfection Expression |
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