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CD/5-FC自杀基因治疗系统对恶性人脑胶质瘤细胞影响的离体研究
引用本文:吕胜青 杨辉 何家全 王彬 YOSHIMURAIchiro 刘运生. CD/5-FC自杀基因治疗系统对恶性人脑胶质瘤细胞影响的离体研究[J]. Acta biochimica et biophysica Sinica, 2003, 35(5): 430-434
作者姓名:吕胜青 杨辉 何家全 王彬 YOSHIMURAIchiro 刘运生
作者单位:中南大学湘雅医院神经外科,第三军医大学新桥医院神经外科,第三军医大学新桥医院神经外科,第三军医大学新桥医院神经外科,Department of Urology,National Defense Medical College,中南大学湘雅医院神经外科 长沙410008,第三军医大学新桥医院神经外科,重庆400037,重庆400037,重庆400037,重庆400037,3-2 Namiki,Tokorozawa,Saitama 359-8513,Japan,长沙410008
摘    要:在离体条件下探讨CD/5 FC自杀基因治疗系统对恶性人脑胶质瘤细胞的抗癌作用。通过将CD基因插入真核表达载体pcDNA3.0多克隆位点构建pCMVCD表达质粒 ,采用限制性内切酶消化鉴定所构建的质粒 ,并进行CD基因测序。采用LipofectAMINE2 0 0 0脂质体介导法将CD基因转染U2 5 1恶性人脑胶质瘤细胞 ,G4 18筛选获得抗性克隆 (取名为U2 5 1/CD细胞 ) ,使用不同浓度的 5 FC作用于U2 5 1/CD细胞 ,MTT法测定活性细胞比率。采用高效液相色谱法 (HPLC)检测 5 FC培养液内 5 FU的浓度。结果如下 :真核表达质粒pCMVCD构建成功 ,并通过酶切鉴定。U2 5 1细胞获得了质粒的成功转染。未转染的U2 5 1细胞对 5 FC不敏感 ,IC50 约为 6 5 0 0 μmol/L ,而转染基因后IC50 约为 10 μmol/L。基因转染使G4 18抗性细胞(U2 5 1/CD细胞 )对 5 FC高度敏感。并且加入不同浓度的 5 FC后 ,U2 5 1/CD细胞培养液内均能检测到 5 FU。实验结果表明 :CD/5 FC系统可以用于胶质瘤的治疗 ,CD基因修饰U2 5 1细胞及其表达的离体研究为胶质瘤基因治疗的在体研究提供依据。

关 键 词:胞嘧啶脱氨酶  5-氟胞嘧啶  基因治疗  恶性胶质瘤

Effects of CD/5-FC Suicide Gene Therapy System on Human Malignant Glioma Cells in Vitro
LV Sheng-Qing ,,YANG Hui,HE Jia-Quan,WANG Bin,YOSHIMURA Ichiro,LIU Yun-Sheng. Effects of CD/5-FC Suicide Gene Therapy System on Human Malignant Glioma Cells in Vitro[J]. Acta biochimica et biophysica Sinica, 2003, 35(5): 430-434
Authors:LV Sheng-Qing     YANG Hui  HE Jia-Quan  WANG Bin  YOSHIMURA Ichiro  LIU Yun-Sheng
Affiliation:LV Sheng-Qing 1,2*,YANG Hui2,HE Jia-Quan2,WANG Bin2,YOSHIMURA Ichiro3,LIU Yun-Sheng 1*
Abstract:
Keywords:cytosine deaminase  5-fluorocytosine  gene therapy  malignant glioma
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