| 成人胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定 |
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| 引用本文： | 李娟,陈海燕,吴英,张强,于小竹,王云,杨涛. 成人胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定[J]. 现代生物医学进展, 2009, 9(11) |
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| 作者姓名： | 李娟 陈海燕 吴英 张强 于小竹 王云 杨涛 |
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| 作者单位： | 南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏,南京,210029 |
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| 摘 要： | 目的:建立人胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定的方法.方法:胶原酶分次消化剪切的人胰腺组织,经过Ficoll密度梯度离心后去除胰岛组织,培养于含,10%胎牛血清的CMRL1066培养液中,7-10天可行成单层细胞,用0.25%胰酶-EDTA消化并传代培养.取2-3代细胞利用免疫荧光染色和RT-PCR方法检测CK19、Pdx-1、Nestin、Insulin及Glucagon的表达.结果:经过胶原酶消化、Ficoll密度梯度离心及后续的培养,去除了胰岛组织及外分泌腺,可获得较纯化的鹅卵石样的胰腺导管细胞.免疫荧光结果示:胰腺导管细胞CK19、Pdx-1和Nestin染色呈阳性,阳性细胞率分别为(87.5±6.2)%、(77.5±8.6)%和(50.9±9.5)%,而Insulin染色为阴性.RT-PCR结果显示该细胞表达CK19、Pdx-1和Nestin基因,而未观察到Insulin及Glueagon基因的表达.结论:该方法可较好的分离纯化出人胰腺导管细胞,经鉴定获得细胞具有胰腺干细胞的特性.
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| 关 键 词： | 干细胞 胰腺 导管细胞 细胞培养 |
Isolation,Purification,Cultivation and Identification of Adult Human Pancreatic Duct Stem Cells in Vitro |
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| LI Juan,CHEN Hai-yan,WU Ying,ZHANG Qiang,YU Xiao-zhu,WANG Yun,YANG Tao. Isolation,Purification,Cultivation and Identification of Adult Human Pancreatic Duct Stem Cells in Vitro[J]. Progress in Modern Biomedicine, 2009, 9(11) |
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| Authors: | LI Juan CHEN Hai-yan WU Ying ZHANG Qiang YU Xiao-zhu WANG Yun YANG Tao |
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