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小鼠SOCS1基因重组腺病毒载体的构建及其在树突状细胞中的表达
引用本文:陈晓波,秦杰,焦洋,钟翠平,谭建明.小鼠SOCS1基因重组腺病毒载体的构建及其在树突状细胞中的表达[J].现代生物医学进展,2007,7(10):1445-1447,1450.
作者姓名:陈晓波  秦杰  焦洋  钟翠平  谭建明
作者单位:1. 上海交通大学附属第一人民医院肾移植科,上海市器官移植临床医学中心,上海,200080
2. 复旦大学,上海医学院解剖组胚系,上海,200032
摘    要:目的:构建含小鼠细胞因子信号抑制因子-1基因(SOCS1)的重组腺病毒载体(Ad5F35-SOCS1),探讨其介导SOCS1基因在小鼠树突状细胞中的表达。方法:设计含AgeI和NheI酶切位点的SOCS1基因上下游引物,以质粒pEF-FLAG-1/mSOCS1为模版,通过PCR扩增获得SOCS1全部序列,片段回收后经AgeI和NheI酶切,再定向插入到经AgeI和NheI酶切的质粒pDc316-LacZa中,获得重组穿梭质粒pDC316-SOCS1,经AgeI和NheI酶切、PCR及测序等鉴定后,用脂质体将穿梭质粒pDC316-SOCS1与腺病毒骨架质粒pBHGF35共转染293细胞,经位点特异性重组获得重组腺病毒Ad5F35-SOCS1,行PCR鉴定,经293细胞扩增、纯化制备高滴度病毒液,TCID50法测定病毒滴度。用获得的重组腺病毒感染小鼠树突状细胞,以免疫组化检测SOVD1的表达。结果:成功构建了含小鼠SOCS1基因的重组腺病毒载体,病毒感染滴度为1.4×10~9IU/ml,该载体能有效介导SOCS1基因在小鼠树突状细胞中的表达。结论:重组腺病毒载体能将SOCS1基因转入小鼠树突状细胞并有效表达,为基因转染制备耐受性树突状细胞奠定了基础。

关 键 词:腺病毒载体  细胞因子信号抑制因子-1  树突状细胞
文章编号:1673-6273(2007)10-1445-03
修稿时间:2007-06-262007-07-28

Construction of Recombinant Adenovirus Vector Containing Mouse SOCS1 Gene and Its Expression in Dentritic Cells
CHEN Xiao-bo,QIN Jie,JIAO Yang,ZHONG Cui-ping,TAN Jian-ming.Construction of Recombinant Adenovirus Vector Containing Mouse SOCS1 Gene and Its Expression in Dentritic Cells[J].Progress in Modern Biomedicine,2007,7(10):1445-1447,1450.
Authors:CHEN Xiao-bo  QIN Jie  JIAO Yang  ZHONG Cui-ping  TAN Jian-ming
Abstract:
Keywords:Adenovirus vector  Suppressor of cytokine signaling-1  Dendritic cell
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