|
|||||
|
|
| 细胞内物质转运调节分子ARFGAP3的克隆表达及生化活性 | |
| 引用本文： | 刘晓勤,张成岗,邢桂春,陈清棠,贺福初.细胞内物质转运调节分子ARFGAP3的克隆表达及生化活性[J].生物化学与生物物理进展,2001,28(4):507-513. |
| 作者姓名： | 刘晓勤 张成岗 邢桂春 陈清棠 贺福初 |
| 作者单位： | 1. 军事医学科学院放射医学研究所,;北京医科大学第一医院神经内科, 2. 军事医学科学院放射医学研究所, 3. 北京医科大学第一医院神经内科, |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(39730310,30070386). |
| 摘 要： | ADP核糖基化因子-GTP酶活化蛋白(ARF GAP)是重要的细胞内物质转运调节分子.在22周孕龄人胎肝cDNA文库中发现一种新基因，其编码的氨基酸序列与大鼠ARF1 GAP有32%同源性.将这种新基因命名为“ARFGAP3”，对其进行功能研究，利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)，从人胎盘总RNA中扩增ARFGAP3全长cDNA序列，并将其亚克隆到pGEM-T载体；采用RNA印迹法和斑点杂交法，检测其组织表达谱，发现在多种腺体和睾丸中有很高水平ARFGAP3基因转录，并且只有一种约2.7 kb的转录本.利用基因重组技术，构建表达质粒pBAD/Thio-ARFGAP3，在大肠杆菌中表达，采用亲和层析法纯化表达产物，利用肠激酶切除重组融合蛋白N端引导序列.检测重组ARFGAP3的生化活性，证实ARFGAP3对ARF1具有GAP活性，促进ARF1结合的GTP水解为GDP，磷脂酰肌醇二磷酸(PIP2)增强其GAP活性，而磷脂酰胆碱(PC)抑制其GAP活性. |
| 关 键 词： | ARFGAP3 细胞内物质转运，ADP核糖基化因子，GTP酶活化蛋白，生化活性 |
| 收稿时间： | 2000/7/27 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2000年7月27日 |
Cloning, Expression and Biochemical Activity of ARFGAP3, a Regulator of Intracellular Transport |
|
| LIU Xiao-Qin,ZHANG Cheng-Gang,XING Gui-Chun,CHEN Qing-Tang and HE Fu-Chu.Cloning, Expression and Biochemical Activity of ARFGAP3, a Regulator of Intracellular Transport[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2001,28(4):507-513. | |
| Authors: | LIU Xiao-Qin ZHANG Cheng-Gang XING Gui-Chun CHEN Qing-Tang and HE Fu-Chu |
| Institution: | Institute of Radiation Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China;Department of Neurology, The First Teaching Hospital, Beijing Medical University, Beijing 100034, China;Institute of Radiation Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China;Institute of Radiation Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China;Department of Neurology, The First Teaching Hospital, Beijing Medical University, Beijing 100034, China;Institute of Radiation Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | ARFGAP3 intracellular transport ADP-ribosylation factor (ARF) GTPase activating protein (GAP) biochemical activity |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |
| 点击此处可从《生物化学与生物物理进展》浏览原始摘要信息 | |
| 点击此处可从《生物化学与生物物理进展》下载免费的PDF全文 | |