| 迟缓爱德华氏菌Eta1-L-Gapdh融合蛋白在蓝藻中的表达 |
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| 引用本文： | 王智,张泽峰,王晶晶,王春梅. 迟缓爱德华氏菌Eta1-L-Gapdh融合蛋白在蓝藻中的表达[J]. 微生物学杂志, 2016, 0(5): 78-84 |
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| 作者姓名： | 王智 张泽峰 王晶晶 王春梅 |
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| 作者单位： | 北京中医药大学 生物制药系，北京 100102,北京中医药大学 生物制药系，北京 100102,北京中医药大学 生物制药系，北京 100102,北京中医药大学 生物制药系，北京 100102 |
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| 基金项目： | 北京中医药大学自主选题课题（2013-JYBZZ-JS-139） |
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| 摘 要： | 在蓝藻中表达迟缓爱德华氏菌Eta1-L-Gapdh融合蛋白。提取迟缓爱德华氏菌基因组DNA为模板,用PCR技术分别扩增两个已知具有较强免疫原性的基因eta1和gapdh,再采用重叠延伸PCR将这两个基因融合,获得目的融合基因eta1-L-gapdh。将目的基因连接到表达载体pRL489的两个Bam H I酶切位点之间构建表达载体,用质粒提取、PCR、酶切、测序等手段对表达载体进行验证。验证正确的表达载体通过三亲接合转化野生鱼腥藻PCC7120,用新霉素抗性筛选出转基因藻落,通过质粒提取和PCR验证转基因藻。用RT-PCR和Western-blot分别从转录水平和翻译水平对转基因藻中融合基因的表达进行了检测。结果表明,含目的基因的表达载体构建成功,目的基因在蓝藻中转录并表达蛋白,该蛋白在蓝藻中的表达量为2.46%。
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| 关 键 词： | 迟缓爱德华氏菌 eta1；gapdh；鱼腥藻PCC7120；三亲接合；融合蛋白 |
The Expression of Edwardsiella tarda Eta1-L-Gapdh Fusion Protein in Blue Algae (Anabaena sp. PCC7120) |
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| WANG Zhi,ZHANG Ze-feng,WANG Jing-jing and WANG Chun-mei. The Expression of Edwardsiella tarda Eta1-L-Gapdh Fusion Protein in Blue Algae (Anabaena sp. PCC7120)[J]. Journal of Microbiology, 2016, 0(5): 78-84 |
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| Authors: | WANG Zhi ZHANG Ze-feng WANG Jing-jing WANG Chun-mei |
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| Affiliation: | Dept. of Biopharm. Sci., Beijing Uni. of Chinese Med., Beijing 100102,Dept. of Biopharm. Sci., Beijing Uni. of Chinese Med., Beijing 100102,Dept. of Biopharm. Sci., Beijing Uni. of Chinese Med., Beijing 100102 and Dept. of Biopharm. Sci., Beijing Uni. of Chinese Med., Beijing 100102 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Edwardsiella tarda eta1 gapdh Anabaena sp. PCC7120 triparental conjugal transfer fusion protein |
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