苏云金芽胞杆菌LM1212菌株cry基因启动子的活性分析 |
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引用本文: | 程丹丹,张睿彬,冮丽丽,彭琦,宋福平.苏云金芽胞杆菌LM1212菌株cry基因启动子的活性分析[J].微生物学通报,2024,51(2):626-641. |
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作者姓名: | 程丹丹 张睿彬 冮丽丽 彭琦 宋福平 |
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作者单位: | 1. 东北农业大学生命科学学院;2. 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家综合治理全国重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(32072499);;中国博士后科学基金(2021M693463)~~; |
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摘 要: | 【背景】前期发现一株具有独特分化表型的苏云金芽胞杆菌(Bacillusthuringiensis,Bt)LM1212,该菌株共有14种杀虫基因,组成了10个转录单元。利用源自菌株LM1212的晶体产生细胞调控因子(crystal producing cell regulator, CpcR)以及其可以激活的cry35-like基因启动子,已在典型Bt菌株HD73中成功构建了非芽胞杀虫蛋白表达体系。【目的】比较菌株LM1212的不同杀虫基因启动子的转录活性,明确可被转录因子CpcR激活的且转录活性较高的启动子,以此为基础优化非芽胞杀虫蛋白表达体系。【方法】将10个启动子区域分别与lacZ报告基因融合构建在pHT304-18Z载体上,得到了10个重组质粒;然后将cpcR基因及其启动子(PcpcR-cpcR)分别反向构建在选取的启动子区域与lacZ报告基因的上游,得到可以表达CpcR且与上述构建相对应的10个重组质粒,将这些重组质粒分别转入不含CpcR的菌株HD73,即获得20个可用于测定β-半乳糖苷酶活性的重组菌株。通过光学显微镜观察和SDS-PAGE检测明确杀虫蛋白表达的情况。【结果】在...
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关 键 词: | 苏云金芽胞杆菌 cry基因启动子 转录活性 草地贪夜蛾 |
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