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SARS-CoV S蛋白受体结合区的重组表达及免疫原性分析
引用本文:马翠卿,周育森,王弋嘉,郭彦,管洁,魏林,何玉先.SARS-CoV S蛋白受体结合区的重组表达及免疫原性分析[J].中国病毒学,2005,20(5):472-475.
作者姓名:马翠卿  周育森  王弋嘉  郭彦  管洁  魏林  何玉先
作者单位:1. 军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071;河北医科大学免疫学教研室,河北,石家庄,050017
2. 军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071
3. 河北医科大学免疫学教研室,河北,石家庄,050017
基金项目:北京科委中英SARS免疫病理学研究课题(H030230100130)
摘    要:为了表达SARS-CoV的S蛋白的受体结合区并对其免疫原性进行分析,用PCR方法扩增S蛋白的受体结合区基因片段,克隆至原核表达质粒pET-32a+并在大肠杆菌中表达,应用Western-blot鉴定表达的目的蛋白,而后以该蛋白作为诊断抗原包被酶联板来检测20份SARS病人血清和28份健康人血清,结果原核表达的S蛋白能够和所用的SARS病人血清反应.这提示表达的S重组蛋白具有良好的抗原性.将变性纯化的重组蛋白和复性蛋白分别皮下免疫小鼠,第三次免疫一周后收集抗血清,用ELISA测定抗体和同时测定中和抗体活性.用变性的抗原免疫的小鼠血清均无中和活性;而用复性的蛋白免疫的小鼠产生了中和抗体.实验表明,S蛋白受体结合区无线性中和表位,中和抗体的产生是由构象表位诱导的.提示该蛋白有可能应用于亚单位疫苗的研究.

关 键 词:严重急性呼吸窘迫综合征病毒(SARS-CoV)  刺突蛋白(S蛋白)  受体结合区
文章编号:1003-5125(2005)05-0472-04
修稿时间:2005年3月27日

Expression and Immunogenicity Analysis of the Receptor-binding Region of SARS-CoV Spike Protein
MA Cui-qing,ZHOU Yu-sen,WANG Yi-jia,GUO Yan,GUAN Jie,WEI Lin,HE Yu-xian.Expression and Immunogenicity Analysis of the Receptor-binding Region of SARS-CoV Spike Protein[J].Virologica Sinica,2005,20(5):472-475.
Authors:MA Cui-qing  ZHOU Yu-sen  WANG Yi-jia  GUO Yan  GUAN Jie  WEI Lin  HE Yu-xian
Abstract:
Keywords:
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