| 表达猪γ干扰素的重组腺病毒的构建和活性鉴定 |
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| 作者姓名： | 姚清侠 徐卓菲 何雁南 司有辉 钱平 陈焕春 |
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| 作者单位： | 华中农业大学,畜牧兽医学院,动物病毒室,武汉,430070;华中农业大学,畜牧兽医学院,动物病毒室,武汉,430070;华中农业大学,畜牧兽医学院,动物病毒室,武汉,430070;华中农业大学,畜牧兽医学院,动物病毒室,武汉,430070;华中农业大学,畜牧兽医学院,动物病毒室,武汉,430070;华中农业大学,畜牧兽医学院,动物病毒室,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家863计划基金(2002AA245071)，湖北省科技攻关(2004AA202B01) |
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| 摘 要： | 以刀豆素A(ConA)诱导的梅山猪外周血淋巴细胞中提取的总RNA为模板,采用RT-PCR方法克隆扩增出全长猪γ干扰素基因(PoIFNγ,501bp)。测序结果证实扩增得到的PoIFNγ与GenBank上所报道的猪γ干扰素基因同源性为100%。将PoIFNγ插入腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV,与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组。在293A包装细胞系中成功包装成完整的病毒粒子。将此重组后的腺病毒连续接种传至第10代,每代提取病毒基因组,PCR均能扩增出目的片段,以细胞病变抑制法(CPE50)测定干扰素生物活性达1.3×106U/mL,证明该种表达猪γ-干扰素的重组腺病毒能稳定传代。
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| 关 键 词： | 猪γ-干扰素 克隆 序列分析 腺病毒 |
| 文章编号： | 1000-8721（2007）05-0394-05 |
| 修稿时间： | 2006-12-21 |
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