β-半乳糖苷酶在枯草芽孢杆菌中的分泌表达 |
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作者姓名: | 陈晓月 金宁一 邹伟 海洋 马海利 李昌 屈勇刚 |
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作者单位: | 吉林大学畜牧兽医学院;长春军事兽医研究所;沈阳农业大学畜牧兽医学院 军事医学科学院军事兽医研究所 军事医学科学院军事兽医研究所 军事医学科学院军事兽医研究所 吉林大学畜牧兽医学院;军事医学科学院军事兽医研究所 吉林大学畜牧兽医学院;军事医学科学院全军基因工程研究中心;吉林大学农学部畜牧兽医学院 吉林大学畜牧兽医学院;军事医学科学院军事兽医研究所;石河子大学动物科技学院 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划) , 教育部科学技术研究项目 , 吉林省科研项目 |
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摘 要: | 为检测本课题组构建的枯草芽孢杆菌分泌表达载体pGPST中启动子和信号肽的活性,将β-半乳糖苷酶基因插入表达载体的多克隆位点,构建含有β-半乳糖苷酶基因的重组质粒pGPST-lacZ,重组质粒转化枯草芽孢杆菌,分别测定液体培养基中上清液和菌体沉淀中β-半乳糖苷酶的活性。培养上清液中的酶活在22h达到峰值,约为26mU/mL,之后开始下降;菌体沉淀中的酶活在14h最高,达6mU/mL,而阴性对照pGPST没有检测到酶活性。结果表明分泌型表达载体中的启动子和信号肽具有较好的活性,能实现异源基因在枯草芽孢杆菌中的分泌表达。本试验为该表达载体的进一步研究和应用提供重要的数据资料,也为外源基因在枯草芽孢杆菌中的表达提供参考资料。该载体将在研究外源基因在枯草芽孢杆菌中表达发挥重要作用。
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关 键 词: | β-半乳糖苷酶 枯草芽孢杆菌 分泌表达 |
收稿时间: | 2007-11-21 |
修稿时间: | 2007-11-20 |
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