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| 粘质沙雷氏菌脂肪酶基因的克隆表达和酶学性质的研究 | |
| 引用本文： | 朱绮霞,陈英,张搏,黄日波.粘质沙雷氏菌脂肪酶基因的克隆表达和酶学性质的研究[J].生物技术,2010,20(5). |
| 作者姓名： | 朱绮霞 陈英 张搏 黄日波 |
| 作者单位： | 1. 广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心,广西,南宁,530007 2. 广西大学生命科学与技术学院,广西,南宁,530005 3. 广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心,广西,南宁,530007;广西大学生命科学与技术学院,广西,南宁,530005 |
| 基金项目： | 广西科技攻关项目，广西科学院创新基金，广西科学院基金项目 |
| 摘 要： | 目的:克隆粘质沙雷氏菌脂肪酶基因(lipA)使其在大肠杆菌B121(DE3)中实现高效表达,并对重组酶进行酶学性质研究.方法:以产脂肪酶粘质沙雷氏菌总DNA为模板,PCR扩增脂肪酶基因lipA,构建重组表达载体pET-lipA,并将其导入大肠杆菌进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和酶学性质的测定.结果:经过优化培养条件,脂肪酶活力最高能达到104U/mL.重组脂肪酶的最适反应温度为40～45℃,最适pH为7.0～7.5,在50℃保温1h下仍能保持80%的酶活力,Ca2+、Sr2+、Mn2+和Mg2+对脂肪酶酶活有较强的激活作用,尤其是Ca2+使脂肪酶酶活提高了1倍多,而Ni2+、Fe2+、Fe3+、Cu2+、Zn2+和Al3+对酶活具有较强的抑制作用,尤其是Zn2+和Al3+使酶活力几乎完全丧失.该酶对一些有机溶剂有较好的耐受性,与50%甲醇混合24h,仍能保持84%的酶活力.结论:该脂肪酶具有较好的热稳定性和甲醇耐受力,作为生产生物柴油的催化剂具有很大的应用价值,为基因工程酶法生产生物柴油打下良好的基础. |
| 关 键 词： | 粘质沙雷氏菌 脂肪酶 克隆 表达 |
Cloning,Expression and Characterization of the Lipase Gene from Serratia marcescens |
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| ZHU Qi-xia,CHEN Ying,ZHANG Bo,HUANG Ri-bo.Cloning,Expression and Characterization of the Lipase Gene from Serratia marcescens[J].Biotechnology,2010,20(5). | |
| Authors: | ZHU Qi-xia CHEN Ying ZHANG Bo HUANG Ri-bo |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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