| 硫矿硫化叶菌P2分子伴侣基因的克隆表达及其性质 |
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| 引用本文： | 褚鑫,王丽,何永志,董志扬.硫矿硫化叶菌P2分子伴侣基因的克隆表达及其性质[J].微生物学报,2008,48(10):1324-1329. |
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| 作者姓名： | 褚鑫 王丽 何永志 董志扬 |
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| 作者单位： | 中国科学院微生物研究所,北京,100101 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 目的]研究重组表达的硫矿硫化叶菌P2分子伴侣β亚基体外同源聚合体的结构和生化功能.方法]利用PCR技术从硫矿硫化叶菌P2的基因组DNA中克隆得到分子伴侣β亚基的基因,将该基因克隆到表达载体pET-21a( )上并在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了表达.对纯化后的β亚基单体进行体外聚合,利用透射电镜观察β分子伴侣的结构,并对其促蛋白折叠性质进行了研究.结果]硫矿硫化叶菌P2分子伴侣β亚基基因在大肠杆菌BL21中实现了高效表达,纯化后的分子伴侣β亚基单体在ATP和Mg2 存在的条件下可自组装形成分子伴侣聚合体.透射电镜观察表明:该β分子伴侣具有Ⅱ型分子伴侣典型的双层面包圈结构,每个环由8个亚基构成.该β分子伴侣具有ATPase活性,最适反应温度为80℃;它不仅能够促进变性的绿色荧光蛋白(GFP)重新折叠,而且还能有效的提高木聚糖酶的热稳定性.结论]本文根据P2基因组序列分析预测的分子伴侣基因设计引物,克隆表达了硫矿硫化叶菌P2分子伴侣的β亚基,纯化后对其进行体外聚合,透射电镜观察表明该聚合体具有Ⅱ型分子伴侣的经典结构,功能分析表明该β分子伴侣能够在体外促进异源蛋白质的折叠、提高其它酶分子的热稳定性.这为进一步深入研究嗜热古菌耐热抗逆的分子机制,奠定了良好的基础.
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| 关 键 词： | 硫矿硫化叶菌 分子伴侣 蛋白折叠 |
Expression and characterization of chaperonin fromSulfolobus solfataricus P2 |
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| Xin Chu,Li Wang,Yongzhi He and Zhiyang Dong.Expression and characterization of chaperonin fromSulfolobus solfataricus P2[J].Acta Microbiologica Sinica,2008,48(10):1324-1329. |
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| Authors: | Xin Chu Li Wang Yongzhi He and Zhiyang Dong |
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| Institution: | Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Sulfolobus solfataricus chaperonin protein folding |
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