| 犬β防御素-1真核表达载体的构建及其在HEK293T细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 靳慧君,仲飞,吴凌娟,解民,王微,韩冬梅.犬β防御素-1真核表达载体的构建及其在HEK293T细胞中的表达[J].动物学报,2008,54(5). |
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| 作者姓名： | 靳慧君 仲飞 吴凌娟 解民 王微 韩冬梅 |
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| 作者单位： | 河北农业大学动物科技学院,河北,保定,071001 |
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| 基金项目： | 河北省科技支撑计划项目，河北农业大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 哺乳动物的β-防御素是一类具有广谱抗微生物活性的阳离子小肽.为了克隆和分析犬β防御素-1基因,并建立一套在HEK293T细胞中高效表达犬β防御素-1的方法,本研究采用RT-PCR方法从犬睾丸组织中扩增出犬β防御素-1(cBD-1)的cDNA基因,并将其克隆到pcDNA3.1A载体中,构建了犬β防御素-1基因的真核表达载体pcDNA3.1A-cBD-1,经磷酸钙介导转染HEK293T细胞进行表达.结果表明:克隆的犬β防御素-1基因序列与已发表序列(GenBank 编号:NM-001024641)的同源性为99.7%.表达犬β防御素-1经Western-blot检测,证明构建的犬β防御素-1基因表达载体能够在真核细胞中表达,表达产物能够分泌到细胞外.为进一步研究犬β防御素的功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | 犬β防御素-1 载体构建 HEK293T细胞 表达 |
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