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快速检测伪狂犬病毒荧光定量PCR技术建立及应用
引用本文:万超,温国元,潘兹书,张楚瑜,熊中良,杨峻,艾地云. 快速检测伪狂犬病毒荧光定量PCR技术建立及应用[J]. Virologica Sinica, 2006, 21(5): 485-489
作者姓名:万超  温国元  潘兹书  张楚瑜  熊中良  杨峻  艾地云
作者单位:武汉大学生命科学学院 病毒学国家重点实验室,武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北武汉430072,湖北武汉430072,湖北武汉430072,湖北武汉430072,湖北武汉430209,湖北武汉430209,湖北武汉430209
基金项目:“十五”国家科技攻关专项(2001BA804-A22)
摘    要:以伪狂犬病毒(PRV)保守的gE基因序列为参考,设计、优化出一对特异的PCR引物和一条TaqMan荧光探针,结合RotorGene检测系统,建立一种快速定量检测伪狂犬病毒的荧光定量PCR技术。该方法线形范围为1.0×102-1.0×107拷贝/μL,灵敏度达102拷贝/μLDNA,比常规PCR高10倍。检测的特异性明显高于常规PCR,同时避免了常规PCR因电泳造成的污染。应用该技术检测66例猪组织或鼻咽拭子样品,阳性42份,阳性检出率为63.6%(42/66)。与病毒分离培养、常规PCR相比较结果显示,该方法具有快速、灵敏、特异、重复性好和能定量检测等优点,该方法可用于猪场PRV感染的快速定量检测和肉类食品进出口检疫。

关 键 词:伪狂犬病毒  荧光定量PCR  定量检测
收稿时间:2006-04-02
修稿时间:2006-04-24

Development of Fluorescent Quantitative PCR Method to Rapidly Detect Pseudorabies Virus
WAN Chao,WEN Guo-yuan,PAN Zi-shu,ZHANG Chu-yu,XIONG Zhong-liang,YANG Jun,AI Di-yun.. Development of Fluorescent Quantitative PCR Method to Rapidly Detect Pseudorabies Virus[J]. 中国病毒学(英文版), 2006, 21(5): 485-489
Authors:WAN Chao  WEN Guo-yuan  PAN Zi-shu  ZHANG Chu-yu  XIONG Zhong-liang  YANG Jun  AI Di-yun.
Affiliation:WAN Chao1,WEN Guo-yuan1,PAN Zi-shu1**,ZHANG Chu-yu1,XIONG Zhong-liang2,YANG Jun2,AI Di-yun2.
Abstract:
Keywords:Pseudorabies virus (PRV)  Fluorescent quantitative PCR  Quantitative detection  
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