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康乃馨ACC氧化酶cDNA的克隆及其反义植物表达载体的构建
引用本文:张树珍,汤火龙,杨本鹏,刘飞虎. 康乃馨ACC氧化酶cDNA的克隆及其反义植物表达载体的构建[J]. 云南植物研究, 2002, 24(6): 775-780
作者姓名:张树珍  汤火龙  杨本鹏  刘飞虎
作者单位:1. 云南大学生命科学与化学学院,云南,昆明,650091;中国热带农业科学院热带作物
2. 中国热带农业科学院热带作物
3. 云南大学生命科学与化学学院,云南,昆明,650091
基金项目:中国博士后基金资助项目
摘    要:以康乃馨(Dianthus caryophyllus L.)花瓣为材料,用改进的异硫氰酸胍一步法提取总RNA,根据已报道的康乃馨ACC氧化酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase,CO)基因的序列设计产合成一对引物,通过RT-PCR方法获得一约1.2kb特异片段,把该片段连接pGEM^(R)-Teasy vector上进行测序,其全长共1156bp,编码区915bp。共编码304个氨基酸残基,序列分析结果表明该序列与GenBankL35152中的康乃馨ACC氧化酶基因的cDNA序列完全相符,推断该基因在康乃馨种内可能是完全或高度保守的,随 后将此片段反向插入植物表达载体pBI121的35S启动子和NOS终止子之间,构建了一反义植物表达载体pBO;又把花特异表达启动子PchsA插入pBI121的HindⅢ Xbal位点构建中间载体pGHB,再把康乃馨ACC氧化酶基因反向插入中间载体pCHB的XbaI Satl位点构建成另一反义植物表达载体pCBO。

关 键 词:康乃馨 ACC氧化酶 cDNA 克隆 反义植物表达载体 RT-PCR
文章编号:0253-2700(2002)06-0775-06
修稿时间:2002-02-21

Cloning of a ACC Oxidase Gene from Carnation Flowers and Construction of It's Antisense Plant Expression Vectors
ZHANG Shu-Zhen ,,TANG Huo-Long,YANG Ben-Peng,LIU Fei-Hu. Cloning of a ACC Oxidase Gene from Carnation Flowers and Construction of It's Antisense Plant Expression Vectors[J]. Acta Botanica Yunnanica, 2002, 24(6): 775-780
Authors:ZHANG Shu-Zhen     TANG Huo-Long  YANG Ben-Peng  LIU Fei-Hu
Affiliation:ZHANG Shu-Zhen 1,2,TANG Huo-Long2,YANG Ben-Peng2,LIU Fei-Hu1
Abstract:
Keywords:Carnation  ACC oxidase  RT-PCR  Antisense plant expression vector  
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