胸腺素α1的乙酰化修饰不依赖于乙酰转移酶RimL

目的：考察大肠杆菌乙酰转移酶RimL对胸腺素α1（Tα1）乙酰化修饰的影响。方法：构建含500bp同源臂的卡那抗性基因打靶片段，利用Red同源重组系统，使大肠杆菌B121（DE3）的rimL基因插入失活，随后导入质粒pCP20去除抗性基因，构建突变菌株rimL-BL21（DE3）；将重组质粒pET-Tα1-L12分别转入出发菌株和突变菌株中进行表达，经固定金属离子亲和层析和反向高效液相层析后，将所得纯品进行质谱分析，精确测定相对分子质量。结果：PCR鉴定结果证明成功敲除rimL基因；质谱结果表明，rimL基因敲除菌中所表达的Tα1-L12融合蛋白与出发菌株一样，均有部分乙酰化修饰。结论：Tα1的乙酰化修饰并不依赖于RimL。