| 表达羊传染性脓疱病毒F1L基因的重组山羊痘病毒的构建与特性鉴定 |
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| 引用本文： | 张倩,王震,张辉,李瑞芳,纪太旺,赵庆亮,陈创夫.表达羊传染性脓疱病毒F1L基因的重组山羊痘病毒的构建与特性鉴定[J].微生物学报,2014,54(7):813-820. |
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| 作者姓名： | 张倩 王震 张辉 李瑞芳 纪太旺 赵庆亮 陈创夫 |
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| 作者单位： | 石河子大学动物科技学院，新疆石河子832000;石河子大学动物科技学院，新疆石河子832000;石河子大学动物科技学院，新疆石河子832000;石河子大学动物科技学院，新疆石河子832000;石河子大学动物科技学院，新疆石河子832000;石河子大学动物科技学院，新疆石河子832000;石河子大学动物科技学院，新疆石河子832000 |
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| 基金项目： | 国家“973 项目”(2010CB30203);国家自然科学基金(30560109) |
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| 摘 要： | 【目的】本文旨在构建可表达羊传染性脓疱病毒F1L基因的重组山羊痘病毒,并对其生物学特性进行初步研究。【方法】将羊传染性脓疱病毒F1L基因与转移载体pUC-TK12连接,同时插入LacZ报告基因和一双向启动子;将重组转移载体转染已接种山羊痘病毒的BHK-21细胞,通过蓝白斑筛选、纯化,对重组病毒进行连续传代培养,应用PCR、间接免疫荧光和Western免疫印迹等方法进行鉴定,并对重组病毒进行不同温度、酸碱度、有机溶剂和紫外照射等处理,进行TCID50评价。rGpv-F1L免疫小鼠后,经酶联免疫吸附实验检测其特异性抗体水平。【结果】成功构建重组病毒转移载体pTL-F1L,将转移载体转染BHK-21细胞后,通过蚀斑纯化获得了可稳定遗传的rGpv-F1L。间接免疫荧光和Western免疫印迹检测发现其可稳定表达F1L蛋白。55℃30min或紫外照射1h即可灭活重组病毒,且其对强酸、强碱、有机溶剂等较敏感。接种重组山羊痘病毒的小鼠40d内机体可持续产生高水平的特异性抗体,与接种Gpv病毒组相比差异极显著(P0.01)。【结论】本文获得了可稳定表达羊传染性脓疱病毒F1L的重组山羊痘病毒疫苗候选株,其具有良好的抗原性和生物学活性,为同时预防羊传染性脓疱病和羊痘提供新途径。
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| 关 键 词： | 关键词:羊传染性脓疱病毒(Orfv)，F1L 基因，重组山羊痘病毒，生物学特性 |
| 收稿时间： | 2013/10/23 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2014/1/16 0:00:00 |
Characterization of a recombinant Goatpox virus expressing Orfv F1L gene |
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| Qian Zhang,Zhen Wang,Hui Zhang,Ruifang Li,Taiwang Ji,Qingliang Zhao and Chuangfu Chen.Characterization of a recombinant Goatpox virus expressing Orfv F1L gene[J].Acta Microbiologica Sinica,2014,54(7):813-820. |
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| Authors: | Qian Zhang Zhen Wang Hui Zhang Ruifang Li Taiwang Ji Qingliang Zhao and Chuangfu Chen |
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