人γ-干扰素生产工艺的研究 |
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引用本文: | 王晓沁,闫玉清,赵滨强,李会成,石福欣.人γ-干扰素生产工艺的研究[J].生物工程学报,1998,14(2):203-207. |
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作者姓名: | 王晓沁 闫玉清 赵滨强 李会成 石福欣 |
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作者单位: | 哈尔滨市医药工业研究所,中国医科大学 |
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摘 要: | 采用高密度发酵法发酵重组人γ干扰素产生菌SWINF/DH5α并成功地获得高表达、高产量的菌体,表达的γ干扰素蛋白占菌体总蛋白的60%以上,20L发酵液可收获2kg(湿重)菌体。纯化过程中采用尿素抽提、稀释、复性、浓缩后通过SephacrylS200柱的纯化方法,简化了纯化步骤,缩短周期,提高了蛋白回收率。纯化中未采用单抗亲和层析技术,使产品更为安全可靠。最终产品经SDSPAGE检测纯度达100%,核酸含量和热原均合格,A280/A260>15,比活性达1×107IU/mg,总回收率达40%。这说明整个工艺适宜大规模生产的需要,具有实际应用价值。
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关 键 词: | 重组人γ-干扰素,发酵工艺,纯化工艺 |
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