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新基因PRR11的克隆、原核表达及鉴定
引用本文:崔涛,兰欢,杜刚,刘革力,易发平,卜友泉,宋方洲. 新基因PRR11的克隆、原核表达及鉴定[J]. 生物技术通报, 2009, 0(3)
作者姓名:崔涛  兰欢  杜刚  刘革力  易发平  卜友泉  宋方洲
作者单位:1. 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室,重庆,400016;重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆,400016
2. 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆,400016
基金项目:国家自然科学基金,重庆市科委自然科学基金,重庆医科大学重点课题 
摘    要:克隆新基因PRR11的开放阅读框区,构建其原核表达载体,并进行表达检测及鉴定.以Hela细胞cDNA为模板,RT-PCR扩增PRR11基因,克隆入原核表达载体PET-28a中,酶切、测序鉴定确认获得PRR11基因的重组原核表达载体PET-28a-PRR11.然后把PET-28a-PRR11重组载体转化到BL21中,经IPTG诱导蛋白表达,提取细胞蛋白并采用SDS-PAGE和蛋白质免疫印迹法检测目的蛋白的表达情况.结果表明成功扩增了PRR11基因,双酶切、测序鉴定证实目的基因成功克隆到原核表达载体PET-28a中,目的蛋白成功表达.成功构建的PRR11基因的原核表达载体,及PRR11的重组蛋白表达产物,为进一步研究PRR11的基因功能奠定了基础.

关 键 词:PRR11基因  原核表达

Cloning,Prokaryotic Expression and Identification of Novel Human Gene PRR11
Cui Tao,Lan Huan,Du Gang,Liu Geli,Yi Faping,Bu Youquan,Song Fangzhou. Cloning,Prokaryotic Expression and Identification of Novel Human Gene PRR11[J]. Biotechnology Bulletin, 2009, 0(3)
Authors:Cui Tao  Lan Huan  Du Gang  Liu Geli  Yi Faping  Bu Youquan  Song Fangzhou
Abstract:
Keywords:PET-28a
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