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基于T7启动子表达系统的牛副流感病毒3型微型基因组的构建与拯救
引用本文:姜男,郑妍鹏,蒋桂云,张伟,焦月盈,付远辉,彭向雷,何金生.基于T7启动子表达系统的牛副流感病毒3型微型基因组的构建与拯救[J].微生物学报,2016,56(11):1746-1754.
作者姓名:姜男  郑妍鹏  蒋桂云  张伟  焦月盈  付远辉  彭向雷  何金生
作者单位:北京交通大学生命科学与生物工程研究院, 北京 100044,北京交通大学生命科学与生物工程研究院, 北京 100044,北京交通大学生命科学与生物工程研究院, 北京 100044,北京交通大学生命科学与生物工程研究院, 北京 100044,北京交通大学生命科学与生物工程研究院, 北京 100044,北京交通大学生命科学与生物工程研究院, 北京 100044,北京交通大学生命科学与生物工程研究院, 北京 100044,北京交通大学生命科学与生物工程研究院, 北京 100044
摘    要:【目的】通过负链RNA病毒反向遗传学操作,构建并拯救以T7启动子表达系统为基础的牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)微型基因组。【方法】分别构建表达该病毒NP、P和L蛋白的辅助质粒px8δT-PT1-b PIV3-NP、px8δT-PT1-b PIV3-P和px8δT-PT1-b PIV3-L以及含增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)开放读码框(Open reading frame,ORF)、BPIV3前导序列(Leader region)、转录起始信号(Gene start signal,GS)、转录终止信号(Gene end signal,GE)和尾随序列(Trailer region)等顺式作用元件(Cis-acting elements)的微型基因组质粒p SC11-b PIV3-EGFP,鉴定正确后,采用2种不同方法拯救BPIV3微型基因组,并通过观察荧光表达情况判断是否拯救成功。【结果】成功构建了基于T7启动子表达系统的BPIV3微型基因组,并实现了拯救。【结论】该系统的成功构建,有助于今后对BPIV3开展基因修饰研究。

关 键 词:牛副流感病毒3型  微型基因组  反向遗传学  拯救
收稿时间:2016/2/22 0:00:00
修稿时间:2016/4/23 0:00:00

Construction and rescue of the minigenome of bovine parainfluenza virus type 3 based on T7 promoter expression system
Nan Jiang,Yanpeng Zheng,Guiyun Jiang,Wei Zhang,Yueying Jiao,Yuanhui Fu,Xianglei Peng and Jinsheng He.Construction and rescue of the minigenome of bovine parainfluenza virus type 3 based on T7 promoter expression system[J].Acta Microbiologica Sinica,2016,56(11):1746-1754.
Authors:Nan Jiang  Yanpeng Zheng  Guiyun Jiang  Wei Zhang  Yueying Jiao  Yuanhui Fu  Xianglei Peng and Jinsheng He
Institution:College of Life Sciences and Bioengineering, Beijing Jiaotong University, Beijing 100044, China,College of Life Sciences and Bioengineering, Beijing Jiaotong University, Beijing 100044, China,College of Life Sciences and Bioengineering, Beijing Jiaotong University, Beijing 100044, China,College of Life Sciences and Bioengineering, Beijing Jiaotong University, Beijing 100044, China,College of Life Sciences and Bioengineering, Beijing Jiaotong University, Beijing 100044, China,College of Life Sciences and Bioengineering, Beijing Jiaotong University, Beijing 100044, China,College of Life Sciences and Bioengineering, Beijing Jiaotong University, Beijing 100044, China and College of Life Sciences and Bioengineering, Beijing Jiaotong University, Beijing 100044, China
Abstract:
Keywords:bovine parainfluenza virus type 3  minigenome  reverse genetics  rescue
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