JAB1与糖皮质激素受体的相互作用及对其转录活性的影响 |
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引用本文: | 李淑蓉,粟永萍,刘云杰,刘晓宏,楼淑芬,程天民.JAB1与糖皮质激素受体的相互作用及对其转录活性的影响[J].生物化学与生物物理进展,2004,31(2):141-145. |
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作者姓名: | 李淑蓉 粟永萍 刘云杰 刘晓宏 楼淑芬 程天民 |
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作者单位: | 1. 第三军医大学基础部神经生物教研室,重庆,400038 2. 第三军医大学全军复合伤研究所,重庆,400038 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展规划项目(973)(G1999054201). |
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摘 要: | 应用酵母双杂交方法筛选到与糖皮质激素受体(GR)结合的蛋白JAB1,进一步验证JAB1与GR的结合作用并证明其对GR的影响.构建与Gal4-BD融合表达的载体pGBKT7-GR LBD,与构建于pACT2载体上的人骨髓cDNA文库杂交,在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp选择培养板上培养,经X-α-gal检测,阳性克隆片段插入pGEM®-T Vector 载体,测序,再经酵母双杂交和GST pull down蛋白质结合实验验证其结合作用,应用反映GR转录活性的CAT报告基因检测JAB1对GR的调节活性.结果在人骨髓cDNA文库中,筛选到42个X-α-gal检测变蓝且含有pACT2质粒序列的克隆,其中有5个克隆的序列皆为Jun活性区结合蛋白JAB1的一部分.酵母双杂交和蛋白质结合实验表明,JAB1与COS7真核表达的GR-LBD在体外有结合作用.JAB1加强GR转录激活的能力.
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关 键 词: | 糖皮质激素受体,JAB1,转录因子,酵母双杂交系统 |
收稿时间: | 2003/6/16 0:00:00 |
修稿时间: | 2003/7/29 0:00:00 |
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