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JAB1与糖皮质激素受体的相互作用及对其转录活性的影响
引用本文:李淑蓉,粟永萍,刘云杰,刘晓宏,楼淑芬,程天民.JAB1与糖皮质激素受体的相互作用及对其转录活性的影响[J].生物化学与生物物理进展,2004,31(2):141-145.
作者姓名:李淑蓉  粟永萍  刘云杰  刘晓宏  楼淑芬  程天民
作者单位:1. 第三军医大学基础部神经生物教研室,重庆,400038
2. 第三军医大学全军复合伤研究所,重庆,400038
基金项目:国家重点基础研究发展规划项目(973)(G1999054201).
摘    要:应用酵母双杂交方法筛选到与糖皮质激素受体(GR)结合的蛋白JAB1,进一步验证JAB1与GR的结合作用并证明其对GR的影响.构建与Gal4-BD融合表达的载体pGBKT7-GR LBD,与构建于pACT2载体上的人骨髓cDNA文库杂交,在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp选择培养板上培养,经X-α-gal检测,阳性克隆片段插入pGEM®-T Vector 载体,测序,再经酵母双杂交和GST pull down蛋白质结合实验验证其结合作用,应用反映GR转录活性的CAT报告基因检测JAB1对GR的调节活性.结果在人骨髓cDNA文库中,筛选到42个X-α-gal检测变蓝且含有pACT2质粒序列的克隆,其中有5个克隆的序列皆为Jun活性区结合蛋白JAB1的一部分.酵母双杂交和蛋白质结合实验表明,JAB1与COS7真核表达的GR-LBD在体外有结合作用.JAB1加强GR转录激活的能力.

关 键 词:糖皮质激素受体,JAB1,转录因子,酵母双杂交系统
收稿时间:2003/6/16 0:00:00
修稿时间:2003/7/29 0:00:00
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