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两栖动物酒精标本DNA模板的快速提取
引用本文:莫邦辉,袁水全,郑渝池,郭骁才,曾晓茂.两栖动物酒精标本DNA模板的快速提取[J].四川动物,2003,22(2):66-68.
作者姓名:莫邦辉  袁水全  郑渝池  郭骁才  曾晓茂
作者单位:1. 中国科学院成都生物研究所,成都 610041
2. 中国科学院成都生物研究所,成都 610041;成都市第一农业科学研究所
基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( 30 0 70 0 90 ),中国科学院西南基地创新工程资助。
摘    要:本文以中国角蟾属4个种的蝌蚪酒精固定标本为材料,取尾部肌肉组织0.1g,滤纸吸干组织块表面的酒精,在研钵中用剪刀剪碎,液氮研磨成粉(必要时可加少量石英砂),转入1.5ml离心管,加入1.0ml提取缓冲液(0.5%SDS,10mmol/L Tris-HCl,100mmol/L EDTA,pH8.0),37℃温浴h,5000r/min离心10min,取上清转入另一1.5ml离心管,氯仿/异戊醇(24:1)抽提两次,上清液加2倍体积预冷(-20℃)的无水乙醇沉淀DNA,12000r/min离心3min,无菌条件下风干后,50μl TE溶解,4℃保存备用。以通用引物PCR扩增12S rRNA和16S rRNA基因部分片段并测序。本文不采用蛋白酶K提取酒精保存标本的DNA模板,全部流程只需3个小时,可同时提取数十个乃至数百个标本,并且所提取的DNA模板适合短片段PCR扩增。

关 键 词:两栖动物  酒精标本  DNA模板  快速提取  测序
文章编号:1000-7083(2003)02-0066-03

A method of DNA extraction from alcohol-preserved tissue of Atympanophrys
MO Bang-hui,YUAN Shui-quan ,ZHEN Yu-chi,GUO Xiao-cai,ZENG Xiao-mao.A method of DNA extraction from alcohol-preserved tissue of Atympanophrys[J].Sichuan Journal of Zoology,2003,22(2):66-68.
Authors:MO Bang-hui  YUAN Shui-quan    ZHEN Yu-chi  GUO Xiao-cai  ZENG Xiao-mao
Institution:MO Bang-hui1,YUAN Shui-quan 1,2,ZHEN Yu-chi1,GUO Xiao-cai1,ZENG Xiao-mao1
Abstract:
Keywords:alcohol-preserved sample  DNA extraction  sequence
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