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一种基于寡核苷酸微阵列芯片的多重可扩增探针杂交技术
引用本文:刘和平,王宏,陆祖宏,刘小平,夏昆,夏家辉.一种基于寡核苷酸微阵列芯片的多重可扩增探针杂交技术[J].遗传学报,2004,31(2):119-124.
作者姓名:刘和平  王宏  陆祖宏  刘小平  夏昆  夏家辉
作者单位:1. 分子与生物分子电子学教育部重点实验室,东南大学生物医学工程系,南京,210096
2. 医学遗传学国家重点实验室,中南大学,长沙,410078
基金项目:国家自然科学基金“创新群体科学基金”项目(编号60121101),国家重大基础研究项目(编号 :973 1 3 0 106),国家重大基础研究项目(编号:2001CB510 30 2 )资助~~
摘    要:多重可扩增探针杂交技术(multiplex amplifiable probe hybridization,MAPH)是近年来发展起来的一种用于基因组中DNA拷贝数检测的新技术。并发展了一种基于寡核苷酸微阵列芯片的MAPH技术。该方法根据所检测的DNA序列,制备若干具有通用引物的FCR产物作为可扩增探针组,与固定在尼龙膜上待测的基因组DNA杂交。用磁珠回收特异性杂交的探针,经生物素标记的通用引物扩增后,与相应的寡核苷酸微阵列芯片杂交。该特异性的寡核苷酸微阵列芯片包括10个抗肌营养不良基因的外显子探针和阴性、阳性探针。杂交清冼后,链霉亲和素-Cy3染色用芯片扫描仪得到杂交的荧光图像。分析荧光信号的强度差异给出特定基因片段拷贝数的变化。该方法用微阵列技术代替MAPH中的电泳检测技术,可大幅度增加检测的通量。选择了一个正常男性、一个正常女性和一个肌营养不良症患者的基因组DNA来进行验证。结果表明,该方法能够同时给出抗肌营养不良基因多个外显子中的基因片段拷贝数差异信息。

关 键 词:基因拷贝数变化  MAPH  DMD/BMD  链霉亲和素-Cy3  多重PCR  寡核苷酸微阵列芯片
文章编号:0379-4172(2004)02-0119-06

A Novel Oligonucleotide Arrays-based Multiplex Amplifiable Probe Hybridization Technology
LIU He-Ping,WANG Hong,LU Zu-Hong.A Novel Oligonucleotide Arrays-based Multiplex Amplifiable Probe Hybridization Technology[J].Journal of Genetics and Genomics,2004,31(2):119-124.
Authors:LIU He-Ping  WANG Hong  LU Zu-Hong
Institution:LIU He-Ping~1,WANG Hong~1,LU Zu-Hong~
Abstract:
Keywords:copy number changes  MAPH  DMD/BMD  streptavidin-Cy3  multiplex PCR  oligonucleotide arrays
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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