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人偏肺病毒TaqMan-MGB探针实时定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用
引用本文:陆柔剑,张陵林,谭文杰,周为民,王仲,彭堃,阮力.人偏肺病毒TaqMan-MGB探针实时定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用[J].生物技术通讯,2008,19(2):207-209.
作者姓名:陆柔剑  张陵林  谭文杰  周为民  王仲  彭堃  阮力
作者单位:1. 中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052
2. 北京协和医院,北京,100730
3. 北京市第六医院,北京,100007
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:目的:建立人偏肺病毒(hMPV)核酸特异的快速、敏感的TaqMan-MGB探针实时定量RT-PCR检测方法.方法:分别设计hMPV特异的引物与荧光标记探针,合成hMPV绝对定量RNA模板,建立实时荧光定量PCR方法,并与常规RT-PCR平行比较,对其灵敏性、特异性和可重复性,以及用于临床样本的适用性等进行评价.结果:本方法可对hMPV进行特异性诊断,检测灵敏度可达10拷贝/25 μL,检测线性范围至少可达10 1~10 6拷贝/反应,且实验重复性好,初步应用于北京地区采集的158份临床鼻咽拭子标本,定量RT-PCR检出31份标本阳性,明显高于常规RT-PCR方法(22/158).结论:建立了人偏肺病毒TaqMan-MGB探针定量RT-PCR检测方法,并初步证实可用于临床鼻咽拭子标本的检测,为开展hMPV的流行监测及临床早期诊断提供了技术手段.

关 键 词:人偏肺病毒  TaqMan-MGB探针  实时定量PCR  病毒  探针  实时定量  检测方法  应用  Beijing  Human  Detection  Assay  Application  手段  临床早期诊断  流行监测  阳性  咽拭子标本  地区  北京  实验重复性  反应  线性范围
文章编号:1009-0002(2008)02-0207-03
修稿时间:2007年11月23

Development and Application of Real-Time RT-PCR Assay for Detection of Human Metapneumovirus in Beijing
LU Rou-Jian,ZHANG Ling-Lin,TAN Wen-Jie,ZHOU Wei-Min,WANG Zhong,PENG Kun,RUAN Li.Development and Application of Real-Time RT-PCR Assay for Detection of Human Metapneumovirus in Beijing[J].Letters in Biotechnology,2008,19(2):207-209.
Authors:LU Rou-Jian  ZHANG Ling-Lin  TAN Wen-Jie  ZHOU Wei-Min  WANG Zhong  PENG Kun  RUAN Li
Abstract:
Keywords:
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