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埃博拉病毒NP蛋白的单克隆抗体制备及抗原肽的定位
引用本文:王晓杜,刘阳,王皓婷,史子学,赵凡凡,魏建超,邵东华,马志永. 埃博拉病毒NP蛋白的单克隆抗体制备及抗原肽的定位[J]. 生物工程学报, 2012, 28(11): 1317-1327
作者姓名:王晓杜  刘阳  王皓婷  史子学  赵凡凡  魏建超  邵东华  马志永
作者单位:浙江农林大学林业与生物技术学院,浙江 临安 311300;中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241;中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241;中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241;浙江农林大学林业与生物技术学院,浙江 临安 311300;中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241;中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241;中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241;中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241
基金项目:农业部公益性行业(农业)科研专项 (No. 200903037-06),江苏出入境检验检疫局项目 (No. 2011KJ03),浙江省自然科学基金 (No. Y3110124) 资助。
摘    要:埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)是一种能导致人类及脊椎动物出血热的致死性病毒,对公共卫生具有较严重的危害。EBOV的NP蛋白在病毒复制中具有重要作用,也是诊断该病重要的靶蛋白。文中原核表达重组扎伊尔型EBOV的NP蛋白,重组蛋白免疫bal/c小鼠,制备了一株小鼠抗EBOV-NP的单克隆抗体。利用Western blotting方法,该抗体能特异识别真核表达和原核表达的重组EBOV-NP,并能同莱斯顿型(RestonEbola virus,REBOV)、科特迪瓦型(Cote-d’Ivoire Ebola virus,CIEBOV)和本迪布焦型(Bundibugyo Ebola virus,BEBOV)埃博拉病毒产生交叉反应,而不与苏丹型(the Sudan Ebola virus,SEBOV)和马堡型(the Marburgvirus,MARV)埃博拉病毒产生反应。利用突变PCR和Western blotting方法,定位了该抗体识别的抗原决定簇序列,该序列(PPLESD)位于EBOV-NP蛋白的C端583-588aa。生物信息学研究表明,该序列在已经公布的ZEBOV、CIEBOV、BEBOV共16个型和REBOV的4个型中高度保守。研究结果为建立以上各型埃博拉病毒的检测方法提供了工具,也为研究埃博拉病毒复制及致病机理提供了基础。

关 键 词:埃博拉病毒  抗原决定簇的定位  单克隆抗体  NP蛋白
收稿时间:2012-05-03

Generation and epitope mapping of a monoclonal antibody against nucleoprotein of Ebola virus
Xiaodu Wang,Yang Liu,Haoting Wang,Zixue Shi,Fanfan Zhao,Jianchao Wei,Donghua Shao and Zhiyong Ma. Generation and epitope mapping of a monoclonal antibody against nucleoprotein of Ebola virus[J]. Chinese journal of biotechnology, 2012, 28(11): 1317-1327
Authors:Xiaodu Wang  Yang Liu  Haoting Wang  Zixue Shi  Fanfan Zhao  Jianchao Wei  Donghua Shao  Zhiyong Ma
Affiliation:1 Forestry and Biotechnology School,Zhejiang Agriculture and Forestry University,Lin’an 311300,Zhejiang,China 2 Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Science,Shanghai 200241,China
Abstract:
Keywords:Ebola virus   epitope mapping   monoclonal antibody   nucleoprotein
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