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利用基因芯片技术区分禽流感病毒主要亚型
引用本文:杨忠苹,王秀荣,田丽娜,王煜,陈化兰.利用基因芯片技术区分禽流感病毒主要亚型[J].微生物学报,2008,48(7):935-940.
作者姓名:杨忠苹  王秀荣  田丽娜  王煜  陈化兰
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室,兽医生物国家重点开放实验室,哈尔滨,15000
2. 重庆出入境检验检疫局,重庆,400020
基金项目:防禽流感高效生物制剂试生产开发(2007DFR30360)
摘    要:目的]研制可同时区分AIV的H5、H7、H9血凝素亚型及N1、N2神经氨酸酶亚型的基因诊断芯片.方法]分别克隆了禽流感病毒的M基因,H5、H7、H9亚型HA基因,N1、N2亚型NA基因以及看家基因GAPDH的重组质粒.以重组质粒为模板,用PCR方法扩增制备探针,纯化后点于氨基修饰的片基上,制备基因芯片.在PCR过程中对待检样品进行标记,然后与芯片杂交,洗涤,扫描并进行结果分析.结果]结果显示检测探针可特异性的与相应的标记样品进行杂交,呈现较强的杂交信号,且无交叉杂交.同时用RT-PCR、鸡胚接种和基因芯片方法对H1-H15亚型AIV参考毒株、30份人工感染样品、21份现地疑似样品进行检测,结果发现,对人工感染样品芯片检测方法与鸡胚接种和RT-PCR的符合率分别为100%和96%,现地样品符合率为100%.结论]研究表明该方法可用于同步鉴别部分主要流行的禽流感亚型,是一种有效的新方法.

关 键 词:基因芯片  禽流感  亚型区分  利用  基因芯片  芯片技术  禽流感  病毒  亚型  DNA  microarrays  Avian  influenza  virus  subtyping  别部  同步  研究  符合率  检测方法  发现  疑似  人工感染  参考毒株  鸡胚接种  杂交信号
文章编号:0001-6209(2008)07-0935-06
修稿时间:2008年1月24日

Typing and subtyping Avian influenza virus using DNA microarrays
Zhongping Yang,Xiurong Wang,Lina Tian,Yu Wang and Hualan Chen.Typing and subtyping Avian influenza virus using DNA microarrays[J].Acta Microbiologica Sinica,2008,48(7):935-940.
Authors:Zhongping Yang  Xiurong Wang  Lina Tian  Yu Wang and Hualan Chen
Institution:Animal Influenza Laboratory of Ministry of Agriculture and National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology of Harbin Veterinary Research Institute of CAAS, Harbin 150001, China;Animal Influenza Laboratory of Ministry of Agriculture and National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology of Harbin Veterinary Research Institute of CAAS, Harbin 150001, China;Animal Influenza Laboratory of Ministry of Agriculture and National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology of Harbin Veterinary Research Institute of CAAS, Harbin 150001, China;Chongqing Entry Exit Inspection and Quarantine Bureau, Chongqing 400020, China;Animal Influenza Laboratory of Ministry of Agriculture and National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology of Harbin Veterinary Research Institute of CAAS, Harbin 150001, China
Abstract:
Keywords:DNA microarray  Avian influenza virus (AIV)  typing and subtyping
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