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极端嗜酸硫杆菌高效筛选、高密度发酵及保藏方法的研究
引用本文:冯守帅,杨海麟,高凯,陈金才,计云鹤,王武. 极端嗜酸硫杆菌高效筛选、高密度发酵及保藏方法的研究[J]. 微生物学通报, 2014, 41(12): 2565-2573
作者姓名:冯守帅  杨海麟  高凯  陈金才  计云鹤  王武
作者单位:江南大学生物工程学院 教育部工业微生物技术重点实验室 江苏 无锡 214122;江南大学生物工程学院 教育部工业微生物技术重点实验室 江苏 无锡 214122;江南大学生物工程学院 教育部工业微生物技术重点实验室 江苏 无锡 214122;江南大学生物工程学院 教育部工业微生物技术重点实验室 江苏 无锡 214122;江南大学生物工程学院 教育部工业微生物技术重点实验室 江苏 无锡 214122;江南大学生物工程学院 教育部工业微生物技术重点实验室 江苏 无锡 214122
基金项目:江苏省创新计划项目(No. CXZZ11_0481);江南大学博士研究生科学研究基金项目(No. JUDCF11013)
摘    要:【目的】针对嗜酸硫杆菌极端特殊的生化特性,分别建立双层平板培养高效筛选方法和补料分批高密度发酵策略,并优选最佳保藏方法,以强化对该类菌种资源的利用和储备效率。【方法】分别采用以异养型微生物Sacchromyces ellipsoideu和Rhodotorula sp.为底层培养物的双层平板培养嗜酸硫杆菌,并结合透射电子显微镜技术(TEM)考察细胞形态差异。结合硫化矿培养基设计及单质硫补料培养策略,延长Acidithiobacillus thiooxidans对数期,提高比生长速率。分析不同保藏方法对嗜酸硫杆菌细胞存活率的影响。【结果】采用异养微生物——Rhodotorula sp.作为底层培养物的双层平板培养法在缩减1/3检出周期的同时将Acidithiobacillus ferrooxidans和Acidithiobacillus thiooxidans的检出率提高了3倍左右。TEM结果表明双层培养中细胞形态更为规则。采用基于Starkey-硫化矿培养基的补料分批发酵策略提高了Acidithiobacillus thiooxidans平均比生长速率,硫对生物量转化率和生产强度分别比分批培养提高31.1%和187.9%。4°C低温保藏方式更适于嗜酸硫杆菌的保藏,有效保藏期1–3月。【结论】Rhodotorula sp.为辅助培养物的双层平板培养法可有效提高嗜酸硫杆菌的筛选效率。设计的Starkey-硫化矿培养基结合补料分批培养策略可实现Acidithiobacillus thiooxidans高密度培养。简单高效的4°C低温保藏方式更适合于嗜酸硫杆菌的中短期保藏。

关 键 词:嗜酸硫杆菌属  双层培养  补料分批策略  菌种保藏

The study on efficient screening, high-density fermentation and preservation methods for extremely Acidithiobacillus sp.
FENG Shou-Shuai,YANG Hai-Lin,GAO Kai,CHEN Jin-Cai,JI Yun-He and WANG Wu. The study on efficient screening, high-density fermentation and preservation methods for extremely Acidithiobacillus sp.[J]. Microbiology China, 2014, 41(12): 2565-2573
Authors:FENG Shou-Shuai  YANG Hai-Lin  GAO Kai  CHEN Jin-Cai  JI Yun-He  WANG Wu
Affiliation:The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China;The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China;The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China;The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China;The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China;The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China
Abstract:
Keywords:Acidithiobacillus   Double-layers culture   Fed-batch strategy   Culture preservation
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