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| PTD融和蛋白的原核表达及其抗体制备 | |
| 引用本文： | 张慧瑛,张玉静,胡薇,明宇,张蕾,郝军元. PTD融和蛋白的原核表达及其抗体制备[J]. 生物技术, 2008, 18(4) |
| 作者姓名： | 张慧瑛 张玉静 胡薇 明宇 张蕾 郝军元 |
| 作者单位： | 1. 吉林大学农学部人兽共患病研究所,吉林,长春130062;河西学院生物系,甘肃,张掖,734000;吉林大学农学部畜牧兽医学院,吉林,长春130062 2. 吉林大学农学部人兽共患病研究所,吉林,长春130062;吉林大学农学部畜牧兽医学院,吉林,长春130062 3. 吉林农业大学,吉林,长春,130118 4. 河西学院生物系,甘肃,张掖,734000 |
| 摘 要： | 目的:为制备凋亡素重组蛋白抗体,首先获得凋亡素重组蛋白融合基因LTA,而且通过原核表达系统表达重组蛋白并制备其抗体,为进一步利用凋亡素重组蛋白导向治疗肿瘤的检测奠定基础.方法:应用重叠延伸的基因融合技术将LHRH(黄体生成激素释放激素)基因、TAT(HIV-1反式转录激活因子)基因和凋亡素基因重组,构建成凋亡素重组蛋白原核表达载体pET-28a-LTA,随后将表达质粒转入BL21菌株,经IPTG诱导表达重组融合蛋白,将已表达的重组蛋白通过Ni-NTA亲和色谱柱进行纯化,并制备LTA凋亡素重组蛋白抗体.结果:表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,LTA蛋白融合基因获得高效表达,凝胶薄层扫描分析表明表达蛋白占菌体蛋白12.6%.LTA蛋白经Ni-NTA亲和色谱柱柱纯化,以纯化蛋白为抗原免疫獭兔制备凋亡素重组蛋白抗血清.结果表明抗体的效价为1: 12800.结论:应用重叠延伸的基因融合技术获得凋亡素重组蛋白融合基因LTA,通过原核表达系统表达重组蛋白并制备其抗体. |
| 关 键 词： | 凋亡素融合蛋白 原核表达 抗体 |
Study on Prokaryotic Expression PTD-apoptin Fusion Protein and Produce Polyclonal Antiserum |
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| ZHANG Hui-ying,ZHANG Yu-jing,HU Wei,MING Yu,ZHANG-Lei,HAO Jun-yuan. Study on Prokaryotic Expression PTD-apoptin Fusion Protein and Produce Polyclonal Antiserum[J]. Biotechnology, 2008, 18(4) | |
| Authors: | ZHANG Hui-ying ZHANG Yu-jing HU Wei MING Yu ZHANG-Lei HAO Jun-yuan |
| Abstract: | |
| Keywords: | TAT |
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